题目内容

【题目】葡萄酒酵母(C1)具有良好的发酵性能,但分解苹果酸能力差,过多的苹果酸会使葡萄酒有酸涩感,解苹果酸裂殖酵母(Ml)具有极强的降解苹果酸能;但发酵性能极差。为了培育新型酵母菌菌种,科研人员采用了以下步骤进行育种。请分析回答:

(1)步骤一:制备原生质体。培养Cl、Ml单倍体亲株,加入一定量的0.5%的蜗牛酶液,保温处理一段时间,用一定浓度的高渗缓冲液洗涤,以确保获得更多的原生质体。

①本实验中,蜗牛酶液的作用是______________

②在无菌条件下,用___________(A:高渗缓冲液、B:低渗缓冲液、C:生理盐水)洗涤,以确保获得更多的原生质体。

③改变蜗牛酶液浓度进行多组实验,结果见图1,分别计算酶浓度为1和1.5时的形成率与再生率,相比较酶浓度为_______________时更适宜。

(2)步骤二:诱导原生质体融合。取Cl、Ml原生质体悬浮液等量混合,离心去除上清液,加入一定量40%的_________溶液,30℃保温20min,镜检并观察融合情况。

(3)步骤三:融合子的鉴定。测定细胞体积及DNA含量,结果见表1,从中挑选出融合子Z13、Z15、Z19、Z29,理由是_____________

(4)步骤四:融合子发酵性能的测定。测定融合子与亲株的降糖能力和降酸能力,图2和图3是对Z29和亲株的测定结果,据图分析可以得出的结论是__________的降糖能力和降酸能力均较好,表明 _________

【答案】 去除细胞壁 A 1.5% 聚乙二醇(PEG) 细胞中DNA含量与两亲本的DNA含量之和接近(DNA含量为4或DNA含量在4左右、接近4) Z29 融合了两亲株的优良性状

【解析】试题分析:本题考查细胞工程,考查对细胞融合方法的理解与识记,考查图表曲线的分析能力。解答此类题目应明确研究目的和研究对象,从曲线图或表格中提取相关信息。

(1)①酵母菌具有细胞壁,本实验中,蜗牛酶液的作用是去除细胞壁。

②在无菌条件下,用高渗缓冲液洗涤,可以避免原生质体不破裂,以确保获得更多的原生质体。

③酶浓度为1.5%时再生率较高,更适宜进行实验

(2)步骤二:聚乙二醇(PEG)可以促进细胞融合。

(3)融合子Z13、Z15、Z19、Z29细胞中DNA含量与两亲本的DNA含量之和接近(DNA含量为4DNA含量在4左右、接近4),属于杂合细胞

(4)据图2可知,Z29M1降糖能力强,具图3可知,Z29降酸能力比双亲均强说明Z29的降糖能力和降酸能力均较好,表明Z29融合了两亲株的优良性状

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