Question

10．随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重．为了筛选出分解石油烃能力更强的微生物，人们不断地进行研究．请回答与此筛选过程有关的问题：
（1）一般来说，微生物生长过程中需要的营养物质包括碳 源、氮源、水、无机盐等．
（2）分解石油烃的微生物一般要从土壤中分离，获取土壤样品的取样地点最好选在石油污染明显处．
如图为获取土壤样品后的培养研究过程

（3）为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过①一④所用培养基，其成分的特点是只含石油烃一种碳源，从而有利于目的菌的生长，抑制其他微生物的生长，这样的培养基可称做选择培养基．
（4）④中的培养基从物理特征看属于固体培养基，这可以通过往培养基中加入一定量的琼脂来实现，对④进行接种常采用的两种方法分别是平板划线法和稀释涂布平板法．
（5）若发现在⑤中无法区分菌落，可以将③中取出的菌液进行梯度稀释．
（6）在实验室应采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌处理．在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行．

Answer 1

分析 1、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐．培养基的分类：①按物理性质分，分为液体培养基和固体培养基，固体培养基中含有凝固剂，一般是琼脂．②按化学成分分，分为天然培养基和合成培养．两者的区别是天然培养基成分不确定，合成培养基成分的含量是确定的．③按用途分，分为选择培养基和鉴别培养基．选择培养基主要是培养、分离特定的微生物，培养酵母菌可在培养基中加入青霉素；鉴别培养基可以鉴定不同的微生物，比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌，可以用伊红-美蓝培养基，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌．
2、常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法．
培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次：高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法．
3、接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．

解答 解：（1）培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐．
（2）要获取相应的菌种，应到相应的环境中获取，获取土壤样品的取样地点最好选在石油污染明显处．
（3）有些培养基可以抑制其他微生物的生长，这样的培养基可称做选择培养基．因此，为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①一④所用培养基，其成分的特点是只含石油烃一种碳源，从而有利于目的菌的生长，抑制其他微生物的生长．
（4）④中的培养基从物理特征看属于固体培养基，可加入凝固剂琼脂处理，常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法．
（5）若发现无法区分菌落，说明稀释度不够，可以将重新进行梯度稀释．
（6）配置好的培养基进行高压蒸汽灭菌，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行．
故答案为：
（1）碳    氮
（2）石油污染明显处
（3）只含石油烃一种碳源   目的菌    选择
（4）固体 琼脂 平板划线法 稀释涂布平板法
（5）进行梯度稀释
（6）高压蒸汽灭菌 无菌

点评 本题的知识点是微生物培养过程中的无菌技术，分离微生物的常用的接种方法和接种工具，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力．