题目内容
【题目】我国饮用水卫生标准规定每毫升水样中细菌总数不得大于100个,大肠杆菌不得检出。某兴趣小组为测定本地自来水中的细菌总数和是否有大肠杆菌,进行了如下实验:
①分别配制营养琼脂培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCI、琼脂、H20)和伊红美蓝培养基(成分:蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红、美蓝、H2O),灭菌。
②取水样。
③先测定甲项指标:用灭菌吸管吸取ImL水样,涂布到营养琼脂培养基中;置于37 ℃培养24h后进行菌落计数。另设一个不加水样的空白对照组。
④用滤膜法测定乙项指标,装置和操作如下图。
回答下列问题:
(1)步骤②取水样前应先将自来水龙头用火焰灼烧3min,目的是_____。
(2)步骤③测定的指标甲是__。水样涂布前无需稀释,理由是____。
(3)步骤④测定乙项指标,主要观察滤膜上是否会出现 ___色菌落。配制伊红美蓝培养基时,先用蛋白胨、NaCl、琼脂配制基础培养基,在l00kPa、121℃条件下灭菌后,冷却至60。C左右,再加入经70kPa、115℃条件下灭菌的乳糖、伊红、美蓝水溶液,后者灭菌条件不同的原因是____。
(4)兴趣小组认为合格的自来水中细菌数量很少,担心检测不到,因而将取得的水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后,再稀释涂布平板计数。这样操作获得的数据___ (填“可信”或“不可信”).理由是____。
【答案】灭菌 细菌总数 自来水中细菌数量很少 紫黑 溶液中的乳糖高温下会破坏 不可信 细菌会在营养培养液中大量繁殖,其数量不能真实反映水样中原有的数量
【解析】
本实验应用到琼脂,是固体培养基,伊红美蓝培养基是一种鉴别培养基,大肠杆菌在伊红美蓝培养基上可呈现深紫色并带有金属光泽。题中指标甲是细菌总数,指标乙是大肠杆菌数。
(1)实验过程要进行严格的灭菌,水龙头用火焰灼烧3min,目的就是灭菌。
(2)实验过程首先要测定细菌的总数,再测定大肠杆菌数,因为自来水中细菌数量很少,所以水样涂布前无需稀释。
(3)指标乙是大肠杆菌,大肠杆菌在伊红美蓝培养基上会呈现紫黑色并带有金属光泽。后者灭菌条件比前者所需要的温度及压强都低,是因为后者操作过程加入了乳糖,溶液中的乳糖高温下会破坏。
(4)若将水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后,则原有水样中的细菌就会在培养液中繁殖,稀释涂布平板计数得到的数量不能真实反映水样中原有的数量,因此这样操作获得的数据是不可信的。