题目内容
【题目】研究性学习小组为了探究酵母菌种群在不同温度条件下种群密度的动态变化，进行了
如下实验：
第一步：配制无菌葡萄糖培养液和活化酵母菌液。
第二步：按右表步骤操作。
第三步：用血球计数板统计起始酵母菌数，并做好记录。
第四步：将各装置放在其他条件相同且适宜的条件下培养。
第五步：连续7天，每天取样计数，做好记录。
请回答下列问题：
（1）从试管中吸出培养液进行计数之前，需将试管________，目的是使培养液中的酵母菌分布均匀，以保证估算的准确性，减少误差。
（2）某同学用血球计数板进行计数时，在显微镜下观察到如图所示的现象，则应采取的措施是____________。
（3）在计数时，按以下顺序操作________（填字母顺序），稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，再将计数板放在显微镜的载物台上计数。
A．吸管吸取培养液滴于盖玻片边缘
B．盖玻片放在计数室上
C．多余培养液用滤纸吸去
（4）步骤五中每天应__________对两组酵母菌进行取样计数。计数时，研究人员将样液稀释10倍，采用血细胞计数板（规格为1 mm×1 mm×0.1 mm）计数，观察到的计数室中细胞分布如下图，则1mL混合样液中含有酵母菌约为__________个。
（5）在实验过程中，培养液的pH值变化为_____（填“变大”“变小”“基本不变”）。实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是错误的，正确的方法是______________。
【答案】振荡 先稀释再计数 B→A→C 定时（固定时间） 3.5×107 变小 浸泡和冲洗
【解析】
①采用抽样检测法对酵母菌进行计数时，为了使培养液中的酵母菌均匀分布，减少误差，应从振荡摇匀的试管中取1mL培养液并适当稀释，然后将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用吸水纸吸干，再将计数板放在显微镜的载物台上计数。②实验过程中，酵母菌进行细胞呼吸产生的CO2会导致培养液的pH值变小。③观察到的视野中，一个中方格内含有14个酵母菌，该中方格含有16个小方格，说明所使用的血细胞计数板的计数室有25个中方格。
(1) 为了使培养液中的酵母菌分布均匀，减少误差，从试管中吸出培养液进行计数之前，需将试管振荡。
(2) 在显微镜下观察到的如图所示的视野内，酵母菌的密度过大，不便对其计数，所以应采取的措施是：先稀释再计数。
(3) 利用血细胞计数板计数时，应先将盖玻片放在计数室上，然后用吸管吸取培养液滴于盖玻片边缘，待培养液从边缘处自行渗入计数室内，再用滤纸吸去多余培养液并静置片刻；待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，再将计数板放在显微镜的载物台上计数。可见，正确的操作顺序为B→A→C。
(4) 步骤五中，对酵母菌计数时的取样时间为无关变量，应控制相同，即每天应定时（固定时间）对两组酵母菌进行取样计数。依题意和图示分析可知：对酵母菌计数时，所使用的血细胞计数板的计数室有25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。视野中一个中方格内的酵母菌数目为14个，则计数室的酵母菌总数为14×25＝350个，而计数室的体积为1×1×0.1＝0.1mm3＝1×10－4mL；由于计数之前将样液稀释10倍，则1mL混合样液中含有酵母菌约为350×10÷（1×10－4）＝3.5×107个/mL。
(5) 在实验过程中，酵母菌进行细胞呼吸产生的CO2溶解在培养液中，导致培养液的pH值变小。实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是错误的，因为血球计数板上的刻度较精细，用试管刷蘸洗涤剂擦洗会破坏血球计数板的刻度，所以正确的方法是将血球计数板进行浸泡和冲洗。
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