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【题目】如图为利用人成纤维细胞（具分裂能力、能在HAT培养基上存活）和小鼠骨髓瘤细胞（具分裂能力、不能在HAT培养基上存活）进行人类基因定位的操作示意图，请回答相关问题。

（1）图示方法应用的技术有 和 。

（2）操作所用的成纤维细胞应传代 代以内，诱导融合时需要加入的促融剂是 。

（3）HAT培养基起 作用，培养时温度应为36.5±0.5℃，操作中加入乌本苷的目的是 。

（4）如表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶（“＋”表示存在，“一”表示不存在），这4种酶均为单基因编码产生，据表判断，编码 酶和 酶的基因位于染色体2上，呈线性排列。

杂交细胞

A

B

C

人类染色体

1

－

＋

＋

2

＋

－

＋

3

＋

＋

－

酶

m

＋

－

＋

n

－

＋

＋

p

＋

－

＋

q

－

＋

＋

【答案】（1）动物细胞融合 动物细胞培养 （2）10 PEG或灭活的病毒 （3）选择 除去成纤维细胞 （4） m p

【解析】（1）分析过程图可知，图中利用促融剂诱导两细胞融合的技术属于动物细胞融合技术；经筛选后的杂交细胞培养利用的是动物细胞培养技术。

（2）操作所用的成纤维细胞应传代10代以内，以保证其维持正常的二倍体核型；诱导动物细胞融合时需要加入的促融剂是PEG或灭活的病毒。

（3）过程图中，融合后的细胞类型有AA、BB和AB型，用HAT培养基进行选择培养时，小鼠骨髓瘤细胞自身融合的BB型细胞不能存活，但人成纤维细胞自身融合的AA型细胞及人成纤维细胞与小鼠骨髓瘤细胞相互融合的AB型细胞均能存活；然后换用含乌本苷的培养基选择培养时，人成纤维细胞自身融合的AA型细胞及人成纤维细胞均不能存活，故经两次筛选可得到人成纤维细胞与小鼠骨髓瘤细胞相互融合的AB型细胞。

（4）分析表中记录可见，C细胞内不含3号染色体但却含有控制4种酶合成的基因，说明控制4种酶合成的基因均不在3号染色体上；A细胞不含1号染色体但却含有m和p两种基因，说明m和p两种基因均不在1号染色体上；结合C细胞核A细胞的结果可知m和p两种基因不在3号和1号染色体上，故可能在2号染色体上；B细胞不含2号染色体但同时含有m和p两种基因，进一步证明了m和p两种基因，均位于2号染色体上，故两者在2号染色体上呈线性排列。

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