题目内容
【题目】回答下列（一）（二）小题：
（一）柑橘汁在国内外市场上是最受人们欢迎的饮料之一。其大致的生产工艺流程如下：柑橘→选果与洗净→榨汁→过滤→果汁的调和→脱油和脱气→加热杀菌→装填和冷却。
（1）为提高柑橘的出汁率，榨汁时一般采用以下两种处理方式：一是加________处理，分解果肉组织中的果胶物质，提高出汁率；二是__________处理，使细胞原生质中的蛋白质凝固，改变了细胞的半透性，从而提高出汁率。
（2）果汁中含有3%～5%的果肉浆能给予果汁良好的色泽和浊度，但过量会使果汁粘稠化。检测柑橘汁中果肉浆含量是否合格，可采用比浊法，需要先绘制果肉浆含量与光密度值关系的______________，再通过测定样品柑橘汁的______________进行计算。
（3）工业生产中的果汁在装填之前需杀菌处理。柑橘的果汁pH一般都较低，因此杀菌时主要以______为杀菌对象。在微生物的分离、计数过程中，常采用_____________法接种，计数过程中统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为____________。
（二）从西非热带植物果实中提取的甜味蛋白质Brazzein是一种高甜度、低热值的新型非糖甜味剂。但是由于受到产地种植的限制等，难以实现Brazzein的大量生产。近几年人们引入生物工程方法获得甜味蛋白。如图是科学家培育能生产甜味蛋白质Brazzein乳腺生物反应器的过程，请回答相关问题：
（1）甜味蛋白质Brazzein基因，可采用PCR技术进行大量扩增，但前提是______________。过程①可采用动物病毒转染法，利用携带目的基因的病毒感染胚胎干细胞，实现对胚胎干细胞的__________。
（2）过程③通常从雌性小鼠的_______________中获取囊胚。过程④是将胚胎干细胞显微注射到小鼠的囊胚腔内形成嵌合体囊胚，将不同来源的基因转移、组合到嵌合体中，利用这一种方法可以解决________________的困难。
（3）过程⑤中要对受体小鼠进行_____________处理，得到的嵌合体小鼠的毛色为___________________。
（4）鉴定嵌合体小鼠是否成功表达甜味蛋白质Brazzein，可以利用_____________原理对小鼠乳汁中的特异性蛋白进行检测。
【答案】果胶酶 加热 标准曲线 光密度值（OD值） 霉菌 稀释涂布 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 甜味蛋白质Brazzein基因序列已知 转化 子宫角或输卵管 远缘杂交不亲和 同期发情 黑白相间 抗原抗体反应
【解析】
果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，也是果汁变得澄清；比浊法测定柑橘汁中果肉浆含量的相关操作可参考泡菜制作过程中亚硝酸盐的测定；微生物接种常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中用稀释涂布法可以得到单菌落，因而可以对微生物计数；培育能生产甜味蛋白质Brazzein乳腺生物反应器的过程中，甜味蛋白质Brazzein基因是目的基因，图中①表示将目的基因导入受体细胞，早期发育的胚胎分为卵裂期、桑椹胚、囊胚、原肠胚等阶段，③获取小鼠囊胚可从生殖器官中（输卵管和子宫角）取出；⑤表示将嵌合体囊胚移植到受体内，着床发育形成个体并表达的过程。
（一）（1）为提高柑橘的出汁率，榨汁时一般采用以下两种处理方式：一是加果胶酶处理，二是加热处理，两者都能提高出汁率。
（2）果汁中含有3%～5%的果肉浆能给予果汁良好的色泽和浊度，但过量会使果汁粘稠化。检测柑橘汁中果肉浆含量是否合格，可采用比浊法，需要先绘制果肉浆含量与光密度值关系的标准曲线，再通过测定样品柑橘汁的光密度值进行计算。
（3）柑橘的果汁pH一般都较低，而细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长，霉菌要求在中性偏酸的环境中生长，因此工业生产中的果汁在装填之前需杀菌处理，此杀菌时主要以霉菌为杀菌对象。微生物的接种、纯化可以用平板划线法和稀释涂布平板法，计数时应用稀释涂布法接种，用该方法接种后，培养基上当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此计数过程中统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。
（二）（1）甜味蛋白质Brazzein基因，可采用PCR技术进行大量扩增，但前提是甜味蛋白质Brazzein基因序列已知。过程①可采用动物病毒转染法，利用携带目的基因的病毒感染胚胎干细胞，实现对胚胎干细胞的转化。
（2）过程③通常从雌性小鼠的子宫角或输卵管中获取囊胚。过程④是将胚胎干细胞显微注射到小鼠的囊胚腔内形成嵌合体囊胚，将不同来源的基因转移、组合到嵌合体中，利用这一种方法可以解决远缘杂交不亲和的困难。
（3）过程⑤将囊胚移植前，要对受体小鼠进行同期发情处理，再移植到受体小鼠的子宫内；甜味蛋白质Brazzein基因来自白色小鼠胚胎干细胞，囊胚来自黑色小鼠，形成的嵌合体囊胚发育得到的嵌合体小鼠的毛色理论上为黑白相间。
（4）鉴定嵌合体小鼠是否成功表达甜味蛋白质Brazzein，可以利用抗原-抗体反应原理对小鼠乳汁中的特异性蛋白进行检测。
