题目内容
【题目】营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，为工业生产提供大量的原料产物。以下是实验人员利用影印法初 检氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题：
（1）过程①的接种方法为__________________________________________。
（2）进行②过程培养时，应先将丝绒布转印至基本培养基上，原因是_____。釆用影 印法培养的优点是_________。
（3）为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员进行了如下操作：
①用接种针挑取_______（选填“菌落 A”或“菌落 B”）接种于盛有完全培养液的离心管中， 28℃振荡培养 12 天后，离心，取沉淀物用______洗涤3次，并制成菌悬液。
②吸取 lmL 菌悬液加入无菌培养皿中，倾注 15mL 融化并冷却至 4550℃的基本培养基，待 其冷凝后用记号笔在皿底划分五个区域，标记为 A、B、C、D、E。
③在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸粉末（如下表所示），经培养后，观察生长圈出 现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。
在上述鉴定实验中，发现在培养基 A、D区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属于_____________________
【答案】 稀释涂布平板法 防止将特定营养成分带入培养基 同种菌株的接种位置相同 菌落 A 无菌水 天冬氨酸缺陷型
【解析】试题分析：本题考查微生物的培养、分离，考查对微生物接种、培养方法的理解。解答此题，可根据基本培养基和完全培养基上菌落的不同挑选缺陷型菌株。
（1）经过过程①，培养皿上菌落较为均匀的分布，接种方法应为稀释涂布平板法。
（2）进行②过程培养时，先将丝绒布转印至基本培养基上，后转印至完全培养基上，而不是反过来操作，目的是防止将完全培养基中特定营养成分带入基本培养基。釆用影印法培养，同种菌株的接种位置相同，可在完全培养基上找出基本培养基不能生存的缺陷菌株。
（3）据图可知，菌落A在基础培养基上不能生长，为营养缺陷型菌株。进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，可用接种针挑取菌落 A接种于盛有完全培养液的离心管中， 28℃振荡培养 12 天后，离心，取沉淀物用无菌水洗涤3次，并制成菌悬液。培养基 A、D区域共有的氨基酸是天冬氨酸，在A、D区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属于天冬氨酸缺陷型。
