题目内容
【题目】请分析下面一项专利：
(1)此基因工程中，所用的目的基因是___________。将人工合成的DNA片段拼接在一起，所必需的工具酶是_________________。
(2)在C端加上KDEL的内质网滞留序列目的是使___________，以免在细胞内被降解。启动子是_________识别和结合的部位，有了它才能驱动基因的转录。
(3)农杆菌介导的方法是将目的基因插入农杆菌Ti质粒的____________上以构建__________。检测受体细胞中是否存在人胰岛素可用___________技术，若有_______出现，表明目的基因已形成相应的蛋白质产品。
【答案】 人胰岛素基因 DNA连接酶 胰岛素合成后在内质网中保存 RNA聚合酶 T-DNA 基因表达载体 抗原-抗体杂交 杂交带
【解析】试题分析：基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取 ②基因表达载体的构建③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测与鉴定。获得目的基因的方法：①从基因文库中获取；②利用PCR技术扩增；③人工合成（反转录法和化学合成）。
（1）根据表格分析可知，此基因工程中的目的基因是人胰岛素基因。基因工程中，将目的基因与运载体连接的酶是DNA连接酶。
（2）重组时，在C端加上KDEL的内质网滞留序列的目的是使合成的胰岛素在内质网中保存，以免被降解。启动子具有RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因的转录过程。
（3）农杆菌介导的方法是将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA上以构建基因表达载体。胰岛素的本质是蛋白质，所以检测受体细胞中是否存在人胰岛素，可以采用抗原-抗体杂交技术，若有杂交带出现，表明目的基因已形成相应的蛋白质产品。
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