题目内容
【题目】海洋藻类上常附着有多种微生物，其中部分在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值，而部分会产生某些毒素污染环境或毒害动物，人们需要对它们进行大量的研究。请回答下列问题：
(1)若要将微生物采用平板划线法进行分离操作，正确的是图_________，其正确操作过程中，划线工具至少要灼烧_________次。
(2)长期保存菌种时，应将培养的菌液与___________充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱保存，丢弃已经接种过微生物的培养基前，往往需要先行灭菌，以免____________________。
(3)A、B两组同学用稀释涂布平板法测定某种微生物的数量，在同一稀释倍数下每隔一段时间记录数据（统计时间内微生物总数在增长过程中），得到以下结果：
培养时间（小时） | 24 | 48 | 72 | 96 |
A组菌落均值（个） | 18 | 25 | 36 | 32 |
B组菌落均值（个） | 20 | 28 | 38 | 32 |
计数时最好取72小时记录的菌落数作为实验结果，原因是①__________________；
②_____________。
(4)发酵工程常常需要对某些微生物进行固定，最常用的方法是_____________法。某真菌产生的油脂不易挥发，可选用_____________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。
【答案】B 5 甘油 污染环境或者对其他生物产生毒害 ①培养时间不足，遗漏菌落数目； ②培养时间过长，两个或多个菌落连成一个菌落（两空位置可以互换） 包埋 萃取法
【解析】
1、平板划线的操作要点：将接种环放在火焰上，灼烧接种环直到烧红；在火焰旁将接种环冷却后，并打开盛有菌液的试管的棉塞，将试管口通过火焰，将已冷却的接种环深入菌液中，蘸取一环菌液，将试管口通过火焰并塞上棉塞，左手将培养皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划3至5条平行线，盖上培养皿盖，注意不要划破培养基；灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始，往第二区域划线重复以上操作，在第三、四区域内划线注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
2、固定化酶和固定化细胞技术是指利用物理或化学方法，将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。
(1)由分析可知：若要将微生物采用平板划线法进行分离操作，图B是正确的，其正确操作过程中，由图中的划线区域共四个，取菌种前以及每次划线前和最后划线完毕都有灼烧，故划线工具至少要灼烧5次。
(2)菌种长期保存的方法是甘油管藏法，故应将培养的菌液与甘油充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱保存，为了避免污染环境或者对其他生物产生毒害，丢弃已经接种过微生物的培养基前，往往需要先行灭菌。
（3）为避免因为①培养时间不足，遗漏菌落数目，或培养时间过长，两②个或多个菌落连成一个菌落，影响计数的结果，故最好取72小时记录的菌落数作为实验结果。
(4)对于细胞经常用包埋法进行固定，故对某些微生物进行固定，最常用的方法是包埋法。对于不易挥发的某真菌产生的油脂，可选用萃取法从菌体中提取。
