题目内容
【题目】下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答：
（1）过程①不能利用人的肝脏细胞来完成，原因是_______________。
（2）过程②称为________，可以用____________(试剂）检验该过程产物的化学本质。
（3）在体外得到大量DNA的PCR技术，与体内DNA复制的不同之处主要表现在温度环境的要求不同。PCR中首先用95℃高温处理，目的是_________，而这一过程在细胞内是通过___________实现的。PCR过程中的引物实质是_________。
（4）⑦过程要用到____________酶从而形成重组分子，为使⑧过程更易进行，应用_________处理大肠杆菌。
【答案】 肝脏细胞中的胰岛素基因不表达（转录） 反转录(逆转录） 二苯胺 使DNA解旋（两条链解开螺旋） 解旋酶 单链DNA DNA连接 Ca2+
【解析】试题分析：图中①表示从胰岛B细胞中获取胰岛素mRNA的过程；②为逆转录过程，A为胰岛素基因；③④⑤表示目的基因的扩增过程；⑥表示用限制酶切割运载体形成黏性末端的过程；⑦表示基因表达载体的构建过程；⑧表示将目的基因导入受体细胞的过程；⑨表示目的基因随着受体细胞的增殖和扩增；⑩是从培养液中获取胰岛素的过程。
（1）基因是选择性表达的，肝脏细胞中的胰岛素基因不表达，所以过程①不能利用人的肝脏细胞来完成。
（2）过程②表示逆转录，产物是DNA，DNA可以用二苯胺水浴加热，进行鉴定。
（3）PCR中首先用95℃高温处理，目的是使DNA解旋，而这一过程在细胞内是通过解旋酶实现的。PCR过程中的引物实质是单链DNA。
（4）⑦表示基因表达载体的构建过程，需要DNA连接酶将目的基因和质粒连接起来。将目的基因导入大肠杆菌前，需要用钙离子处理大肠杆菌。
