题目内容
【题目】由腊梅凝集素基因控制合成的某种蛋白质能与蚜虫肠道粘膜上的受体结合，从而抑制蚜虫吸收营养物质。通过基因工程将腊梅凝集素基因转入烟草，可增强其抗蚜虫的能力。请回答下列问题：
（1）在逆转录酶的作用下，能以腊梅凝集素基因产生的mRNA作为模板按照____________获得cDNA片段，以获取腊梅凝集素基因片段。为使腊梅凝集素基因在烟草细胞中高效表达，需要把目的基因片段插入表达载体的____________之间。
（2）将表达载体导入烟草细胞常用的方法是______________，在该过程中需添加酚类物质，目的是____________。腊梅凝集素基因的遗传特性能在烟草体内维持和表达的关键是____________。
（3）将转基因烟草幼苗与非转基因烟草幼苗隔区种植，并接种等量的蚜虫，一定时间后用____________法统计蚜虫的种群密度，若____________，则说明转基因烟草具有抗蚜虫能力。
【答案】 碱基互补配对原则 启动子、终止子 农杆菌转化法 吸引农杆菌感染烟草细胞 目的基因插入到了烟草细胞的染色体DNA上 样方 转基因烟草幼苗区内的蚜虫密度低于非转基因烟草幼苗区
【解析】本题考查基因工程及其应用，要求考生理解基因工程的操作程序，能利用所学知识构建基因表达载体并将其导入受体细胞内，明确不同种群密度的调查方法。
（1）根据题意，在该基因工程中，可在逆转录酶的作用下，以腊梅凝集素基因产生的mRNA作为模板按照碱基互补配对原则获得cDNA片段，以获取取腊梅凝集素基因片段（目的基因）。为使腊梅凝集素基因在烟草细胞中高效表达，需要把目的基因片段插入表达载体的启动子、终止子之间，其中启动子的功能是启动目的基因的转录过程，终止子的功能是终止目的基因的转录过程。
（2）将基因表达载体导入植物（烟草）细胞常用的方法是农杆菌转化法；在该过程中需添加酚类物质，目的是吸引农杆菌感染烟草细胞。腊梅凝集素基因的遗传特性能在烟草体内维持和表达的关键是目的基因插入到了烟草细胞的染色体DNA上，随染色体DNA的复制而复制。
（3）调查植物和活动能力弱、活动范围小的动物以及昆虫卵等的种群密度常用样方法，将因此转基因烟草幼苗与非转基因烟草幼苗隔区种植，并接种等量的蚜虫，一定时间后用样方法统计蚜虫的种群密度；若转基因烟草幼苗区内的蚜虫密度低于非转基因烟草幼苗区，则说明转基因烟草具有抗蚜虫能力。
生物种类 | 植物细胞 | 动物细胞 | 微生物细胞 |
常用方法 | 农杆菌转化法 | 显微注射法 | 转化法 |
受体细胞 | 体细胞或受精卵 | 受精卵 | 原核细胞 |
转化过程 | 将目的基因插入到Ti质粒的T－DNA上→导入农杆菌→侵染植物细胞→整合到受体细胞的染色体DNA上→表达 | 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 | Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 |
【题目】小球藻是一种单细胞的绿藻，为研究不同浓度的纳米银对小球藻光合作用和细胞呼吸的影响，研究人员用不同浓度的纳米银溶液培养小球藻，实验结果如下表所示。已知酸、碱、重金属离子、高温等均会使蛋白质发生变性。请回答下列问题：
纳米银浓度 （mg·L-1） | 净光合速率 （μmolO2·m-2·s-1） | 细胞呼吸速率 （μmolO2·m-2·s-1） | 叶绿素a含量 （mg·g-1） |
0 | 8 | 1 | 0.070 |
1 | 2 | 0.2 | 0.038 |
5 | 1 | 0.1 | 0.018 |
10 | 0.5 | 0.001 | 0.015 |
（1）叶绿素a在小球藻细胞中分布在__________________。在测定叶绿素a含量时，首先要对小球藻细胞内的光合色素进行_________，再进行定量测定。
（2）在测定纳米银对小球藻细胞呼吸的影响时，应在_________环境中进行实验。在10mg·L-1纳米银浓度条件下，小球藻的细胞呼吸速率几乎完全被抑制，其可能原因主要是纳米银_________。
（3）将培养在1mg·L-1纳米银浓度条件下的小球藻置于0mg·L-1浓度条件下培养，小球藻净光合速率低于8μmolO2·m-2·s-1，根据上表从光反应的角度推测，主要的原因是___________________________。