Question

【题目】“分离”作为一种传统生物技术，在生产实践中具有广泛的用途。请回答下列有关微生物的分离纯化和血红蛋白分离的问题：

（1）微生物分离实验中常用的接种工具有______________________；分离纯化微生物的方法有很多，最常用的是平板划线法和______________________；平板划线法是通过_____________________，从而实现对微生物的分离。

（2）已知一种有机物ⅹ（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。要从土壤中筛选出能高效降解有机物X的细菌，在配制培养基时应以___________作为唯一碳源，因此这类培养基属于________培养基；在接种前，通常要随机选取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是_________。

（3）分离不同种类的蛋白质常用凝胶色谱法，该方法是根据___________对蛋白质进行分离，利用血红蛋白作为分离样品的优点有______________________。

Answer 1

【答案】接种环（针）、涂布器 稀释涂布平板法 接种环在固体培养基表面的连续划线 有机物X 选择 检测培养基平板灭菌是否合格 相对分子质量的大小 能清晰观察到红色的区带在洗脱过程中的移动情况

【解析】

1、微生物常见的接种的方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2、凝胶色谱法的原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。

（1）微生物接种和分离纯化的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，使用的接种工具分别是接种环（针）和涂布器。平板划线法是通过接种环（针）在固体培养基表面的连续划线，使聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落，从而实现对微生物的分离。

（2）要筛选能降解有机物X的细菌，应该以有机物X作为唯一的碳源，只能分解有机物X的细菌才能生长，其他不能利用有机物X的细菌不能生长，这种类型的培养基属于选择培养基。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，用于检测培养基平板灭菌是否合格。

（3）凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质。由于血红蛋白有颜色，利用血红蛋白作为分离样品能清晰观察到红色的区带在洗脱过程中的移动情况。