Question

【题目】α—抗胰蛋白酶(ATT)是种急性时相反应蛋白，有蛋白酶抑制作用。下图是将人的ATT基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产人ATT的过程图。请回答问题：

（1）过程①中采集的精子要进行________处理，过程②得到的卵母细胞，一般要培养到_________阶段才能进行体外受精。

（2）过程③中构建基因表达载体需要____________酶、___________酶，将基因表达载体通过__________法导入牛的受精卵。

（3）过程⑤早期胚胎培养过程中不仅要加入氧气维持细胞呼吸，还要提供一定浓度的_________以维持培养液的pH。为让受体牛的生理状态与供体牛一致，需要对受体牛注射激素做__________处理。

（4）当早期胚胎发育到_____________阶段时，将胚胎移入受体母牛子宫内。通过胚胎分割能提高胚胎的利用率，胚胎分割属于动物__________(填“无性”或“有性”)繁殖的方法。

Answer 1

【答案】（1）获能 减数第二次分裂中期（MⅡ中期）

（2）限制 DNA连接 显微注射

（3）CO2 同期发情

（4）桑椹胚或囊胚 无性

【解析】（1）过程①中采集的精子要进行获能处理，过程②得到的卵母细胞，一般要培养到减数第二次分裂中期（MⅡ中期）阶段才能进行体外受精。

（2）构建基因表达载体时，首先需要用同种限制酶切割外源DNA分子和运载体，其次需要用 DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子；将基因表达载体导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。

（3）过程⑤早期胚胎培养过程中不仅要加入氧气维持细胞呼吸，还要提供一定浓度的CO2以维持培养液的pH。为让受体牛的生理状态与供体牛一致，需要对受体牛注射激素做同期发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境。

（4）当早期胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段时，将胚胎移入受体母牛子宫内。通过胚胎分割能提高胚胎的利用率，胚胎分割属于动物无性繁殖的方法。