题目内容

【题目】1表示抗体的基本结构,VL是轻链可变区,VH是重链可变区。不同抗体可变区不同。杂交瘤技术的出现使抗体的制备进入了单克隆时代,而20世纪90年代发明的噬菌体抗体库技术为单抗的制备开辟了全新领域。图2表示人源性噬菌体抗体生产过程流程图。

请回答下列问题:

1)运用杂交瘤技术制备单克隆抗体,用特定的选择培养基筛选获得杂交瘤细胞后,再经过___________________,目的是筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。与常规的血清抗体相比,单克隆抗体最大的优越性是___________________

2)在免疫过程中,需要向健康人体注射特定抗原(如乙肝疫苗),并且每隔一周重复注射一次,重复注射的目的是______________________________________

3)过程①使用了RT-PCR技术,与常规PCR技术相比较,RTPCR增加了_____过程。

4)从人源性噬菌体抗体生产过程分析,含抗体基因片段最终需要整合到_________中。

【答案】克隆化培养 抗体检测 特异性强、灵敏度高,可大量制备 加强免疫,增加体内特定浆细胞的数量 逆转录 噬菌体DNA

【解析】

1、杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖,又能产生专一抗体;人工免疫时需要定期注射抗原,其目的是加强免疫,使机体产生更多的浆细胞。

2、图2过程①先是以mRNA为模板合成DNA,然后再利用PCR使其扩增;在PCR中需要加入特定的引物;将目的基因导入大肠杆菌时,需要先用钙离子处理大肠杆菌使其成为感受态细胞。噬菌体在侵染细菌时,是其遗传物质DNA进入大肠杆菌体内,因此需要将含抗体基因片段整合到噬菌体DNA中。

1)用特定的选择培养基筛选获得杂交瘤细胞后,需要再经过克隆化培养和专一抗体检测,目的是筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。与常规的血清抗体相比,单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高,可大量制备的优点。

2)人工免疫时需要多次注射疫苗,增加抗原数量,其目的是加强机体免疫能力,增加体内特定浆细胞的数量。

3RT-PCR技术是mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增的过程。过程①使用了RT-PCR技术,与常规PCR技术相比较,RT-PCR增加了逆转录过程,需要逆转录酶。

4)噬菌体在侵染大肠杆菌时,其遗传物质DNA进入大肠杆菌体内,并在大肠杆菌内完成复制,因此含抗体基因片段最终需要整合到噬菌体DNA中。

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