题目内容
【题目】下图为将某动物的抗冻蛋白基因导入烟草细胞后培育抗冻烟草的过程示意图。请据图回答下列问题：
（1）对获得的抗冻蛋白基因可通过________快速扩增其数量，该过程中需要的酶是____________。A过程中需用到的工具酶包括_____________________。
（2）B过程常采用_________法将抗冻蛋白基因导入烟草细胞，为检测抗冻蛋白基因是否整合到烟草细胞染色体的DNA上，可利用___________制成的探针通过DNA分子杂交进行检测。
（3）C过程中，转基因烟草细胞经诱导形成愈伤组织的过程称为__________，然后再发育成完整的幼苗。C过程运用的主要生物技术所依据的生物学原理是_______________。
【答案】PCR技术（聚合酶链式反应） 耐高温的DNA聚合酶 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 农杆菌转化法 放射性同位素标记的抗冻蛋白基因的DNA片段 脱分化 植物细胞的全能性
【解析】
识图分析可知：图示为将某动物的抗冻蛋白基因导入烟草细胞后培育抗冻烟草的过程示意图，A表示基因表达载体的构建，B表示将重组质粒导入受体细胞，C表示通过植物组织培养得到抗冻烟草。
（1）对获得的抗冻蛋白基因可通过PCR快速扩增其数量，该过程中需要的酶是耐高温的DNA聚合酶（Taq酶），根据以上分析可知，A过程表示基因表达载体的构建，该过程中需用到的工具酶包括限制酶和DNA连接酶。
（2）识图分析可知，B过程表示将重组质粒导入植物细胞，常采用农杆菌转化法将抗冻蛋白基因导入烟草细胞，为检测抗冻蛋白基因是否整合到烟草细胞染色体的DNA上，可利用DNA分子杂交法进行检测，用放射性同位素标记的抗冻蛋白基因的DNA片段制成的探针，与烟草细胞核内提取的DNA分子进行杂交，观察有无杂交带出现。
（3）C过程中转基因烟草细胞经诱导形成愈伤组织的过程称为脱分化，然后再发育成完整的幼苗。C过程运用的主要生物技术所依据的生物学原理是植物细胞的全能性。
【题目】回答下列有关实验设计的问题。
金鱼是常见的观赏性驯养动物，取材容易，观察现象明显，常用做实验材料。实验小组观察发现在饲养金鱼时，鱼缸窄小或鱼饲养量过多都会使鱼浮上水面直接呼吸，即发生浮头现象。为确定鱼缸内金鱼适宜饲养量，小组确定了以下实验方案。
（1）据题意可知，金鱼出现浮头现象是由于水中缺少溶解氧，因此，将探究课题确定为_____________
（实验试剂与器材）
隔夜自来水、保鲜膜、漏网、计时器、若干塑料方盒、家用增氧泵等。
（实验过程）
（2）制作冷却沸水
将部分隔夜自来水煮沸后冷却，密封备用，其目的是________________。
（3）筛选适用金鱼
为了获得客观、准确的结果，选择实验金鱼的原则是_________________。
（4）测定不同溶解氧浓度下金鱼每分钟的呼吸次数（呼吸频率），如表1所示。
表1
实验组号 | 溶氧量 | 培养环境 | 观察指标 | |||||
呼吸频率（第1次） | 呼吸频率（第2次） | 呼吸频率（第3次） | …… | 呼吸频率（第n次） | Y1（次/min） | |||
A | 0.2mg/L | X1 | 160 | 152 | 156 | 161 | ||
B | 6.2mg/L | X2 | 78 | 80 | 80 | 83 | ||
C | 8.0mg/L | X3 | 57 | 61 | 60 | 63 | ||
表1中，如果X1代表冷却沸水，根据上述实验试剂与器材创建的条件X2应为________，X3应为___________。
（结果分析）
（5）利用3种不同溶氧浓度的前3次呼吸频率数据，制作溶氧量和呼吸频率的相关性用柱状图表示。___________
（6）简要分析实验结果并得出结论：_____________________________。
