Question

【题目】生物兴趣小组以甜菜嫩叶为材料提取DNA，主要实验步骤如下，其中氯仿-异戊醇不溶于水，且密度均大于水。请分析回答：

（1）图1以甜菜嫩叶为材料，每毫克组织所提取的DNA量较高，原因是_____________。

（2）图1步骤①中甜菜组织研磨前先经液氮冷冻处理的主要优点是_________________。在常温条件下，也可向切碎的组织材料中加入一定量的____________________，再进行充分搅拌和研磨。

（3）图1步骤③将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是___________________。步骤④加氯仿-异戊醇，离心后取上清液的原理是_______________________________。

（4）根据图1操作步骤可知，影响DNA纯度的物质主要有____________________和小分子物质等。

（5）电泳可以直观对比DNA的完整性，分子大小不同的DNA在凝胶上迁移速率不同，从而产生不同的条带。图2是利用三种不同的方法提取到的甜菜嫩叶总DNA凝胶电泳结果，其中M是已知大小的不同DNA的混合物。实验结果显示A、B方法提取的总DNA电泳结果只有一条带，而C方法有明显的“拖尾”现象。出现“拖尾”现象的原因是________________________________________________。

Answer 1

【答案】嫩叶细胞分裂旺盛 充分破碎植物细胞，使研磨充分 洗涤剂和食盐 使蛋白质变性 DNA不溶于氯仿-异戊醇，蛋白质等溶于氯仿-异戊醇 蛋白质、RNA DNA发生断裂或降解，形成许多大小不等的DNA片段

【解析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。

2、DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

（1）图1以甜菜嫩叶为材料，嫩叶细胞分裂旺盛，每毫克组织所提取的DNA量较高。

（2）图1步骤①中甜菜组织研磨前先经液氮冷冻处理的主要优点是充分破碎植物细胞，使研磨充分。在常温条件下，也可向切碎的组织材料中加入一定量的洗涤剂和食盐，再进行充分搅拌和研磨。

（3）将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是使蛋白质变性。步骤④加氯仿-异戊醇，离心后取上清液的原理是DNA不溶于氯仿-异戊醇，蛋白质等溶于氯仿-异戊醇。

（4）根据图1操作步骤可知，影响DNA纯度的物质主要有蛋白质、RNA和小分子物质等。

（5）DNA分子在进行凝胶电泳时，由于DNA发生断裂或降解，形成许多大小不等的DNA片段，因此会出现“拖尾”现象。