题目内容
【题目】CTAB法是一种提取植物DNA的方法。CTAB是一种阳离子去污剂，能与核酸形成复合物，在高盐（>0.7mol/LNaCl）浓度下可溶，在低盐（0.1-0.5mol/LNaCl）浓度下，复合物就因溶解度降低而沉淀，而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。通过有机溶剂抽提，去除蛋白质等杂质后，加入异丙醇获得的沉淀物为CTAB与核酸复合物，用体积分数为75%的乙醇洗涤可去除CTAB。请回答下列问题：
（1）CTAB提取液中，NaCl浓度为1.4mol/L的目的是_________。步骤4中用体积分数为75%的乙醇洗涤沉淀物的目的是去除_________。
（2）苹果组织研磨前经液氮冷冻处理，更易于研磨的原因是_________。
（3）用体积分数为75%的乙醇洗涤后的沉淀物中含有RNA，为得到较为纯净的DNA，可先用_________溶液溶解，然后加入_________酶，然后再重复步骤_________，最后在上清液中加入一定体积的、冷却的_________，可以得到纯净的DNA。
【答案】溶解CTAB与核酸复合物 CTAB 冷冻后的细胞易破碎 2mol/L的NaCl RNA ② 体积分数为95%的乙醇
【解析】
DNA粗提取和鉴定的原理：
1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。
2、DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
DNA粗提取实验材料的选择的原则为：材料易取，DNA含量高，一般动物材料中选择鸡血，植物材料中选择猕猴桃。
（1）根据题干信息“CTAB能与核酸形成复合物，在高盐（>0.7mol/LNaCl）浓度下可溶”所以NaCl浓度为1.4mol/L的目的是溶解CTAB与核酸复合物；题干中的信息“用体积分数为75%的乙醇洗涤可去除CTAB”，所以步骤4中用体积分数为75%的乙醇洗涤沉淀物的目的是去除CTAB。
（2）由于冷冻后的细胞易破碎，所以需要将苹果组织研磨前经液氮冷冻处理。
（3）由于DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度较大，所以为了得到较为纯净的DNA可以先用2mol/L的NaCl溶液溶解，加入RNA酶，将RNA水解，重复步骤②，由于DNA分子不溶于酒精，而细胞中的其他蛋白质溶于酒精，所以可以加入加入一定体积的、冷却的体积分数为95%的乙醇，得到纯净的DNA。
