题目内容
【题目】MseⅠ、PstⅠ、EcoRⅠ三种限制酶的识别序列及切割位点分别是GAAT↓TAATTC、C↓TGCAG、G↓AATTC，如图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切点。图3表示利用基因工程生产胰岛素的三种途径。图4表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径。请据图回答问题。
（1）若要用如图1和图2中的质粒和外源DNA构建重组质粒，需要对质粒进行改造，构建新的限制酶切位点。在构建新的限制酶切位点的过程中需要使用哪些工具酶___________________。
（2）图3中催化过程①的DNA连接酶的作用是促使形成_________________，导入受体细胞B常用方法_______________，④过程也可以培养到______________，再从培养液中提取。导入受体细胞C首先使用Ca2+处理使其吸收周围的DNA分子，之后将细胞C与图中M溶于_____________________中，完成转化过程。
（3）获得动物1的受体细胞通常是受精卵，哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程中，注射促性腺激素后还需_______________的诱导下才能完成。动物2体内各体细胞的基因种类________________。上述动物的获得均需运用_________________________技术。
（4）干细胞科技发展至今，已进入以脐带、胎盘等组织为主要干细胞来源的全新时代。目前国内干细胞临床研究超过半数采用脐带或胎盘干细胞。胎盘干细胞由囊胚的________________细胞发育而来，利用胎盘干细胞具有发育全能性的特点，所以临床上可以用于__________________，从而挽救器官衰竭的患者的生命。
【答案】限制酶EcoRⅠ、DNA聚合酶、DNA连接酶 磷酸二酯键 农杆菌转化法 愈伤组织 缓冲液 精子 不相同 胚胎移植 滋养层 器官移植
【解析】
分析题图：图1质粒中含有限制酶PstⅠ和EcoRⅠ的切割位点，图2含目的基因的外源DNA中含有限制酶PstⅠ、MseⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中EcoRⅠ酶的切割位点位于目的基因中。
（1）质粒只有EcoR I酶和Pst I酶的识别位点，外源DNA分子含有Mse I酶、EcoR I酶和Pst I酶识别位点，且切割获得目的基因需要Mse I酶和Pst I酶，对质粒改造使，需构建新的限制酶酶切位点；首先用EcoRⅠ处理质粒；然后用DNA聚合酶处理质粒，使被切开的质粒末端连接上相应的脱氧核苷酸；再用DNA连接酶处理质粒，形成了的限制酶酶切割位点，这样它可被MetⅠ识别。
（2）催化过程①的DNA连接酶的作用是促使磷酸二酯键的形成；将目的基因导入受体细胞B（植物细胞）的常用方法是农杆菌转化法；④过程也可以培养到愈伤组织后再从培养液中提取产物；导入受体细胞C）需要用Ca2+处理使大肠杆菌处于感受态，之后将细胞C与图中M溶于缓冲液中，完成转化过程。
（3）使成熟卵子形成的过程是在受精过程中完成的，因此细胞只有在精子的作用下才能形成成熟卵子；动物2是由注入体细胞（含目的基因）的囊胚发育而来的，该动物含有目的基因的体细胞与其他体细胞的基因种类不同；上述动物的获得均需运用胚胎移植技术。
（4）胎盘干细胞可来源于囊胚的滋养层；由于胎盘干细胞具有发育的全能性，所以临床上可以用于器官移植，从而挽救器官衰竭的患者的生命。
孟建平小学滚动测试系列答案
