题目内容
【题目】农业科技工作者在烟草中找到一种抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉细胞中，培育抗病棉品系。请回答下列问题。
（1）要获得该抗病基因，可采用从基因文库中获取、_______________ 等方法。将抗病基因转入棉细胞时，最常用的运载体是__________。
（2）若运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如图示：
则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是（____）
（3）切割完成后，需用_____ 酶将运载体与该抗病基因连接，得到_______分子。
（4）将抗病基因转入棉细胞时，可先将重组DNA分子导入农杆菌______ 的T-DNA上，再用该农杆菌去侵染______，从培养得到的植株中筛选获得抗病棉。
（5）这种方法比较经济和有效，称作______法。除此之外，还有基因枪法和_______法等。
（6）将含抗病基因的棉细胞培养得到完整抗病棉还需用____________ 技术。
【答案】 化学方法（人工合成PCR扩增） 质粒 A DNA连接 重组DNA Ti质粒 棉细胞 农杆菌转化 花粉管通道法 植物组织培养
【解析】本题考查基因工程，要求考生理解基因工程的原理和操作程序，掌握将目的基因导入植物细胞的方法，明确基因工程在植物育种上的应用。
（1）根据题意，要获得该抗病基因，可采用从基因文库中获取、化学方法（人工合成PCR扩增）等方法。植物基因工程中将抗病基因转入棉细胞时，最常用的运载体是质粒。
（2）基因工程中，将目的基因与运载体结合需要使用DNA连接酶，遵循碱基互补配对原则，将互补的黏性末端连接起来，分析EcoRⅠ切割后产生的片段可知，其黏性末端的碱基序列可以和A选项的黏性末端进行连接。
（3）基因工程中，可利用DNA连接酶将运载体目的基因基因连接，得到重组DNA分子。
（4）将抗病基因转入棉细胞时，可先将重组DNA分子导入农杆菌Ti质粒的T-DNA上，再用该农杆菌去侵染棉细胞，从培养得到的植株中筛选获得抗病棉。
（5）利用农杆菌Ti质粒将目的基因转入植物细胞的方法叫农杆菌转化法，除此之外，将目的基因导入植物细胞的方法还有基因枪法和花粉管通道法等。
（6）将含抗病基因的棉细胞培养成完整抗病棉利用的是植物组织培养技术。
