题目内容
【题目】转基因生物培育成功的关键是保证目的基因在受体中的正常表达或抑制特定基因的表达。在这个过程中，根据获得的目的基因不同、采取的措施不同等，培育时选择的方法也不相同。回答下列相关问题：
（1）利用乳腺生物反应器获得胰岛素的过程中，为保证通过反转录法获得的胰岛素基因能正常表达，在构建基因表达载体时需将获得的含目的基因的片段连接在__________之间，然后通过_________的方法将基因表达载体导入__________________中。
（2）为降低耐除草剂转基因水稻通过花粉传播而引起的环境生物安全问题，一是利用转入的耐除草剂基因的位置进行控制，如__________________；二是将耐除草剂基因拆分为两部分，只有两部分片段同时存在才具有耐除草剂的特性，请提出可行的措施：____________________________________。
（3）下图中插入颠倒的转录区的目的是__________________，其原理可能是颠倒的转录区与转录区形成的RNA通过_________原则形成双链而无法使转录区形成的RNA与核糖体结合。
【答案】（乳腺蛋白基因的）启动子和终止子 显微注射 （发育为）雌性个体的受精卵 将耐除草剂基因导入到叶绿体中 将拆分后的基因分别导入不同的个体，获得纯合品系1和品系2，将两者杂交获得同时具有两个片段的个体 抑制转录区基因的表达 碱基互补配对
【解析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；
（4）目的基因的检测与鉴定：
分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；
个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
（1）在构建基因表达载体时需将获得的含目的基因的片段连接在乳腺蛋白基因的启动子和终止子之间；将目的基因转入动物细胞通常采用显微注射法，受体细胞通常是雌性个体的受精卵。
（2）为降低耐除草剂转基因水稻通过花粉传播而引起的环境生物安全问题，一种方法是可以将将耐除草剂基因导入到叶绿体中，形成的花粉就不含有目的基因；另一种方法是将耐除草剂基因拆分为两部分，只有两部分片段同时存在才具有耐除草剂的特性，具体措施将拆分后的基因分别导入不同的个体，获得纯合品系1和品系2，将两者杂交获得同时具有两个片段的个体。
（3）在启动子后插入颠倒的转录区可以抑制基因的表达；颠倒的转录区与转录区形成的RNA二者通过碱基互补配对的原则形成双链从而抑制翻译过程。
一线名师提优试卷系列答案
【题目】肝癌在我国的发病率高，容易复发，远期疗效不满意。研究人员对肝癌细胞的结构及代谢进行了相关的研究。癌细胞有无限增殖的特点，肿瘤恶性增殖往往快于血管新生的速度，随着细胞数目增多和体积增大，恶性实体肿瘤内部逐渐形成慢性营养缺乏的微环境，因此肿瘤细胞需要通过调整细胞代谢才能继续生存。
（1）线粒体是调控细胞代谢最重要的细胞器，通过不断地分裂和融合调控自身功能，并对外界刺激做出适应性反应。下图是细胞呼吸及线粒体融合和分裂的示意图：
①葡萄糖在_________中分解为[H]和A，物质A进入线粒体彻底氧化分解。线粒体内膜上分布的呼吸链复合体是参与有氧呼吸第三阶段的酶，内膜向内折叠形成嵴的意义是_________________________。
②由图可知线粒体外膜上的Mfn1/Mfn2蛋白、内膜融合蛋白_________的作用实现了线粒体膜的融合，线粒体的长度明显变长。细胞质基质中DRP1的S616位点磷酸化，DRP1定位于线粒体外膜上，促进__________________。
（2）已有研究发现肝癌肿瘤中心区域细胞中线粒体融合增强，线粒体长度明显长于边缘区域细胞，这些变化与肝癌细胞适应营养缺乏有关。为研究在营养缺乏时线粒体融合对肝癌细胞糖代谢的调控，研究者用肝癌细胞进行了实验，实验结果如下表：
| 细胞耗氧速率 | 线粒体ATP产生量 | 胞外乳酸水平 | 线粒体嵴密度 | 呼吸链复合体的活性 | 乳酸脱氢酶量 |
甲组：常规培养组 | 4．2 | 1．0 | 0．35 | 10．1 | 0．91 | 1．01 |
乙组：营养缺乏组 | 5．6 | 1．4 | 0．28 | 17．5 | 2．39 | 0．25 |
丙组：营养缺乏+抑制DRP1S637磷酸化 | 3．1 | 0．8 | 0．38 | 9．8 | 1．22 | 1．22 |
注：线粒体嵴的密度=嵴的数目/线粒体长度 乳酸脱氢酶是能催化丙酮酸生成乳酸的酶
丙组抑制DRP1S637磷酸化的目的是___________________________。根据实验结果并结合（2），完善肝癌细胞在营养缺乏条件下的代谢调途径：肝癌细胞在营养缺乏时，__________________使线粒体融合增强，从而使线粒体嵴密度增加、呼吸链复合体的活性增加，有氧呼吸增强；同时因__________________而导致无氧呼吸减弱，细胞产能效率提高，从而适应营养缺乏环境。
【题目】研究表明，遗传性骨骼发育不良症的发生与常染色体上M基因的突变有关。现有一遗传性骨骼发育不良症家系如下图，科研人员对该家系各成员M基因所在的同源染色体上相应位点序列进行检测，结果如下表。下列有关叙述正确的是（ ）
成员 | 测序结果 |
I-1，I-2、II-1，III-1 | …TCCTGCCAGTGGTTTTA… |
II-2、III-2 | …TCCTGCCAGTGGTTTTA…和…TCCTGCCGGTGGTTTTA… |
A.II-2的致病基因来自于I-1和I-2
B.M基因发生了G-C碱基对替换为A-T导致突变
C.I-1产生配子时发生了M基因隐性突变可能导致该家系遗传病发生
D.II-2的早期胚胎细胞中发生了M基因显性突变可能导致该家系遗传病发生