题目内容
【题目】肠出血性大肠杆菌是能导致人体患病的为数不多的几种大肠杆菌中的一种，人体感染该种大肠杆菌后的主要症状是出血性腹泻，感染严重者可出现溶血性尿毒综合征（HUS），危及生命。该大肠杆菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色，从而形成透明圈。下图为从被肠出血性大肠杆菌污染的食物中分离和提纯该大肠杆菌的操作流程示意图。请回答下列相关问题：
（1）肉汤培养基可为培养的微生物提供的营养成分包括________________________。
（2）以上操作中在血平板上的接种方法是________________；第一次接种操作前和整个接种操作结束后均需要对接种工具进行灼烧灭菌，其目的分别是________和________。
（3）为了进一步研究该大肠杆菌的抗原性，常利用________法分离其蛋白质，若甲蛋白质比乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是________。在装填凝胶柱时，不得有气泡产生，是因为________________。
【答案】碳源、氮源、水、无机盐等 平板划线法 杀死接种环上的微生物，避免污染培养基（灭菌） 避免污染环境和感染操作者 凝胶色谱 乙蛋白质 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱顺序降低分离效果
【解析】
凝胶色谱法（分配色谱法）：①原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。②凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。③分离过程：混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子，洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。④作用： 分离蛋白质，测定生物大分子分子量，蛋白质的脱盐等。
（1）肉汤培养基是天然培养基，可为培养的微生物提供的营养成分包括碳源、氮源、水、无机盐等。
（2）图示中用到了接种环从液体培养基中接种到固体培养基中，因此在血平板上的接种方法是平板划线法。第一次接种操作前对接种工具进行灼烧灭菌，其目的是杀死接种环上的微生物，避免污染培养基（灭菌），整个接种操作结束后对接种工具进行灼烧灭菌，其目的是避免污染环境和感染操作者。
（3）为了进一步研究该大肠杆菌的抗原性，常利用凝胶色谱法分离其蛋白质。分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快，若甲蛋白质比乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是乙蛋白质。在装填凝胶柱时有气泡产生，就会在色谱柱内形成无效的空隙，使本该进入凝胶内部的样品分子从这些空隙中通过，搅乱洗脱液的流动次序，影响分离的效果。
