Question

【题目】下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素 抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，直线所示为BamH I、HindⅢ、Sma I三种限制酶的酶切位点。据图回答：

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时切害繊体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。能驱动人乳铁蛋白基因在牛的乳腺细胞中特异性表达的调控因子是图中的 。过程①采用的操作方法通常是 。

（2）过程②采用的生物技术是 ，对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体，进行胚胎分割时，应选择发育良好，形态正常的 进行分割，目前最常见的是经分割产生的同卵 胎。

（3）对代孕牛的要求是 。

Answer 1

【答案】（1）HindⅢ,和BamHI 氨苄青霉素 启动子 显微注射法

（2）胚胎移植 桑椹胚或囊胚 双

（3）体质健康且繁殖能力正常

【解析】

试题分析：（1）外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位点，其中限制酶SmaI的切割位点位于目的基因上，所以获取目的基因和构建基因表达载体时，应用限制酶HindⅢ和BamHⅠ。用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割质粒后，会破坏质粒上的四环素抗性基因，但不会破坏氨苄青霉素抗性基因，因此筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含氨苄青霉素的培养基上进行。启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列，是基因的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度。过程①是将重组质粒导入动物细胞的过程，常用显微注射法。

（2）过程②是将早期胚胎移入代孕牛的体内，利用的是胚胎移植的技术。胚胎分割时应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。

（3）代孕牛要有健康体质和正常繁殖能力。