题目内容
【题目】前列腺癌是发生在前列腺上皮的恶性肿瘤，可分为雄性激素依赖性和雄性激素非依赖性两种类型。请回答下列问题。
（1）研究发现，前列腺癌发生的根本原因是外界致癌因子引起了__________，可能还与饮食习惯等因素有关。
（2）为了探究奥曲肽对两种前列腺癌的治疗效果，研究者对体外培养的人前列腺癌DU145和LNCaP细胞采用不同剂量奥曲肽（0、0.1、1、10、100和1000nmol/L）处理，分别于24h、48h、72h测定并计算细胞增殖抑制率，结果如下图所示。
注：DU154是雄性激素非依赖性前列腺癌细胞；LNCaPj 雄性激素依赖性前列腺癌细胞。
①在培养过程中，动物细胞具有__________生长的特点，当培养的细胞增殖到一定程度时，会出现__________现象，因此要对其进行传代培养，通常需要用__________酶处理，使细胞分散开以备新的细胞悬液。
②由上图结果可知，奥曲肽对于__________性前列腺癌的治疗效果可能更好。
（3）为进一步探明奥曲肽的作用机制，研究人员在相同条件下，用1000nmol/L的该多肽处理DU145细胞，分别于24h、48h、72h提取各组细胞总RNA，再以mRNA为模板__________出cDNA，然后用PCR技术扩增相应片段，并对扩增结果进行凝胶电泳来测定细胞中VEGF和Caspase-3的转录水平，结果如下图所示。
注：VEGF是促进血管生成的基因，可刺激肿瘤细胞的生成和增殖：Caspase-3是细胞凋亡过程中最主要的蛋白酶基因
β-actin是检测基因表达水平常用的参照基因，表达量不受细胞形态变化或生活条件的影响，转录水平相对稳定，在实验中可作为校准和消除由于检测方法等无关变量对实验结果的影响。β-actin的表达产物最可能是____________________（填字母）。
A．血红蛋白 B．细胞骨架蛋白 C．胰岛素
由实验结果可知，奥曲肽抑制了DU145细胞中__________基因的转录水平。据此研究人员推测，奥曲肽治疗前列腺癌的机制可能是__________（2分）。
【答案】 基因突变（原癌基因和抑癌基因发生突变） 贴壁 接触抑制 胰蛋白 雄性激素非依赖 逆转录 B VEGF 通过抑制VEGF基因的表达，减少肿瘤细胞增殖和肿瘤血管的生成，从而抑制肿瘤生长：促进Caspase-3基因的表达，加速肿瘤凋亡
【解析】试题分析：奥曲肽（1000nmol/L，处理24h）对于雄性激素非依赖性前列腺癌细胞DU145抑制率较高，故奥曲肽对于雄性激素非依赖的治疗效果更好。奥曲肽处理DU145细胞时间越长VEGF基因的表达量越少，Caspase-3基因的表达越高，由实验结果可知，奥曲肽抑制了DU145细胞中VEGF基因的表达，促进Caspase-3基因的表达：。
（1）癌症发生的原因是致癌因子引起了基因突变（原癌和抑癌基因发生突变），可能与饮食习惯等因素有关。
（2）①动物在培养过程中，细胞具有贴壁生长的特点，癌细胞失去接触抑制，因此传代培养时，通常用胰蛋白酶处理，使细胞分散。
在培养过程中，动物细胞具有贴壁生长的特点，当培养的细胞增殖到一定程度时，会出现接触抑制现象，因此传代培养时，通常用胰蛋白酶处理，使细胞分散。
②由图1结果可知，奥曲肽（1000nmol/L，处理24h）对于雄性激素非依赖性前列腺癌细胞DU145抑制率较高，故奥曲肽对于雄性激素非依赖的治疗效果更好。
（3）为进一步探明奥曲肽的作用机制，研究人员在相同条件下，用1000nmol/L的该多肽处理DU145细胞，分别于24h、48h、72h提取各组细胞总RNA，再以mRNA为模板逆转录出cDNA，然后用PCR技术扩增相应片段，p-actin基因检测基因表达水平常用的参照基因，表达量不受细胞形态变化或生活条件的影响，转录水平相对稳定，在实验中可作为校准和消除由于检测方法等无关变量对实验结果的影响。而A血红蛋白基因和C胰岛素基因并非在所有细胞中都有表达，表达量受细胞形态变化（细胞分化）的影响，转录水平不稳定，故p-actin的表达产物最可能是B细胞骨架蛋白（该基因在所有细胞中都表达）。
由图2可知：奥曲肽处理DU145细胞时间越长VEGF基因的表达量越少，Caspase-3基因的表达月高，由实验结果可知，奥曲肽抑制了DU145细胞中VEGF基因的表达，减少肿瘤细胞增殖和肿瘤血管的生成，从而抑制肿瘤生长，促进Caspase-3基因的表达，加速肿瘤凋亡。
