题目内容
【题目】抗体的结构如图所示,它由两条H链和两条L链组成。同一物种C区氨基酸序列恒定,不同抗体结合抗原的V区氨基酸序列有差异。
(1)在生物体内,抗体是由________细胞分泌的,该细胞可以来自____________增殖分化。
(2)传统方法获取抗体时,需要将相应的抗原反复注射到动物体内,从动物的血清中分离。显然,这种方法产生的抗体量和纯度等都很低特异性差,单克隆抗体的出现,克服了传统抗体的不足,单克隆抗体是指________________。
(3)天然的抗体左右两个V区结构完全相同,只能结合相同的抗原。通过一定技术手段可以得到双功能抗体(又叫双特异性抗体),它的两个V区能结合不同的抗原。制备双功能抗体的基本方法如下:将能分泌抗体1的杂交瘤细胞(A细胞)与能分泌抗体2的淋巴细胞(B细胞)进行融合,形成可分泌两种亲代抗体和杂种抗体的杂种—杂交瘤细胞(A—B)。细胞融合时需要用_______________、聚乙二醇或电激等诱导,融合后总共应该有______________种细胞(最多考虑两两融合)。
(4)双功能抗体在癌症治疗中可作为“生物导弹”:用其中一个V区识别癌细胞表面_________,用另一个V区将T细胞等杀伤细胞定向带到癌细胞所在的位置,这里,T细胞对癌细胞的攻击属于____免疫。
(5)细胞融合方法得到的双功能抗体,只是将两个不同抗体的V区集中到了一个抗体上,人们无法改变V区的结构。通过____技术,可以对双功能抗体的V区进行设计改造,使其更适合人类的需要。这种改造,最终还必须通过对DNA分子的改造来完成。
【答案】浆(或效应B) B细胞或记忆B细胞 由单一B细胞克隆而成的细胞群分泌产生的抗体 灭活的病毒 5 特定的抗原 细胞 蛋白质工程
【解析】
1、单克隆抗体的制备
(1)制备产生特异性抗体的B淋巴细胞:向免疫小鼠体内注射特定的抗原,然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞
(2)获得杂交瘤细胞①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合;②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞,该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
(3)克隆化培养和抗体检测
(4)将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖
(5)提取单克隆抗体:从细胞培养液或小鼠的腹水中提取
2、单克隆抗体的应用
(1)作为诊断试剂,具有准确、高效、简易、快速的优点。
(2)用于治疗疾病和运载药物。
3、蛋白质工程:指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行基因改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需要。
(1)在生物体内,抗体是由浆细胞分泌的,该细胞可以来自于B细胞或记忆B细胞增殖分化。
(2)单克隆抗体是指:由单一B细胞克隆而成的细胞群分泌产生的抗体。
(3)细胞融合时需要用灭活的病毒、聚乙二醇或电刺激等方法诱导,但是融合率达不到100%.融合后总共应该有5胞(最多考虑两两融合),用A、B字母表示出这些细胞组合为A-A、B-B、A-B、A、B。
(4)V区具有识别抗原的作用,双功能抗体在癌症治疗中可作为“生物导弹”:用其中一个V区识别癌细胞表面特定的抗原,用另一个V区将T细胞等杀伤细胞定向带到癌细胞所在的位置,T细胞对癌细胞的攻击属于细胞免疫。
(5)通过蛋白质工程技术,可以对双功能抗体的V区进行设计改造,使其更适合人类的需要。
【题目】图 1 是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图,载体 质粒 P0 具有四环素 抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。请回答下列问题:
(1)EcoR V 酶切位点为,EcoR V 酶切出来的线性载体 P1 为__________未端。
(2)用 Taq DNA 聚合酶进行 PCR 扩增获得的目的基因片段,其两端各自带有一个腺 嘌呤脱氧核苷酸。载体 P1 用酶处理,在两端各添加了一个碱基为___________ 的 脱氧核苷酸,形成 P2;P2 和目的基因片段在__________酶作用下,形成重组质 粒 P3。
(3)为筛选出含有重组质粒 P3 的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到 A、B、C 三类菌落,其生长情况如下表(“+”代表生长,“﹣”代表不生长)。根据表 中结果判断,应选择的菌落是_____(填表中字母)类,另外两类菌落质粒导入情况分别是_____、___________________。
菌落类型 平板类型 | A | B | C |
无抗生素 | ﹢ | ﹢ | ﹢ |
氨苄青霉素 | ﹢ | ﹢ | ﹣ |
四环素 | ﹢ | ﹣ | ﹣ |
氨苄青霉素+四环素 | ﹢ | ﹣ | ﹣ |
(4)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒,拟设计引物进行 PCR 鉴定。图 2 所示为甲、乙、丙 3 条引物在正确重组质粒中的相应位置,PCR 鉴定时应选择的一对引物是____________。某学生尝试用图中另外一对引物从某一 菌落的质粒中扩增出了 400 bp 片段,原因是_______________。