Question

【题目】苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒蛋白．如图是转Bt毒蛋白基因植物的培育过程示意图（amp′为抗氨苄青霉素基因），①～④表示过程．请据图作答：
（1）由HindⅢ酶切后，得到的DNA片段的末端碱基序列是 ．
（2）将图中①所示的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，产生种DNA片段，②过程可获得种重组DNA．如果只用BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得种重组DNA．
（3）该过程中Bt毒蛋白基因插入Ti质粒后，不应影响质粒的__________（多选）．
A.复制
B.转录
C.碱基对的数量
D.抗性基因的表达
（4）用农杆菌的Ti质粒作运载体，目的是 ． 筛选含重组DNA的农杆菌，培养基中应添加 ．
（5）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是 ．

Answer 1

【答案】
（1）
（2）4；2；2
（3）ABD
（4）利用农杆菌Ti质粒的T﹣DNA，将Bt毒蛋白基因整合到植物细胞染色体DNA上；氨苄青霉素
（5）降低害虫种群中抗Bt毒蛋白基因的基因频率的增长速率
【解析】解：（1）由HindⅢ酶识别序列为 切后，因此，得到DNA片段的末端是 ．（2）图①中，从苏云金杆菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3种DNA片段．而质粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2种DNA片段，其中有1种与目的基因相同，所以反应管中有4种DNA片段．因HindⅢ、BamHⅠHind切割质粒可形成两种长度不同的片段，因此用DNA连接酶连接形成的重组质粒有2种；而BamHⅠ切割质粒只能形成一种长度的片段，但可能会出现正向和反向连接，所以用DNA连接酶能连接形成2种重组质粒．（3）质粒要能进行复制才能得到更多的表达产物，所以构建基因表达载体后，不能影响质粒的复制、表达和抗性基因的表达．（4）用农杆菌的Ti质粒作运载体，目的是利用农杆菌Ti质粒的T﹣DNA，将Bt毒蛋白基因整合到植物细胞染色体DNA上．筛选含重组DNA的农杆菌，培养基中应添加氨苄青霉素．（5）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中抗Bt毒蛋白基因的基因频率的增长速率． 所以答案是：（1） （2）4 2 2（3）ABD（4）利用农杆菌Ti质粒的T﹣DNA，将Bt毒蛋白基因整合到植物细胞染色体DNA上 氨苄青霉素（5）降低害虫种群中抗Bt毒蛋白基因的基因频率的增长速率
【考点精析】掌握基因工程的原理及技术是解答本题的根本，需要知道基因工程的原理是利用DNA重组技术．