Question

【题目】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：

（1）①中在核移植前通常使用_______ 去除卵母细胞的细胞核

（2）步骤中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其_____分离出ES细胞中添加____，如牛黄酸等化学物质时，就可诱导ES细胞向不同组织分化。

（3）步骤③中，需要构建含有Rag2因的表达载体。可以根据Rag2基因的_____设计引物，利用______ 技术扩增Rag2基因片段，该基因表达载体的组成，还必须有______，___________________ 以及标记基因等。

（4）为检测Rag2基因的表达情况，除分子检测外有时还管要进行_______水平的鉴定。

Answer 1

【答案】显微操作（去核法）方法 内细胞团 分化诱导因子 核苷酸序列 PCR 启动子 终止子 个体生物学

【解析】

分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程，其中①表示获得重组胚胎的过程；②表示早期胚胎培养过程；③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞。

（1）①中在核移植前通常使用显微操作方法去除卵母细胞的细胞核。
（2）步骤中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从内细胞团分离出ES细胞。在培养液中添加分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可诱导ES细胞向不同组织分化。
（3）步骤③中，需要构建含有Rag2因的表达载体。可以根据Rag2基因的核苷酸序列设计引物，再利用PCR技术扩增Rag2基因片段。该基因表达载体的组成，必须有启动子、终止子以及标记基因等。
（4）为检测Rag2基因的表达情况，除分子检测外，有时还管要进行个体生物学水平的坚定。