题目内容
【题目】科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高。下图中①～⑦是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ表示相关结构。请据图作答：
（1）获取“鱼抗冻蛋白基因”有几条途径，其中一条途径是以 为模板，在 的催化下，合成互补的单链DNA，然后再合成双链DNA；另一条途径是从基因文库中获取，基因文库又可分为 文库和部分基因文库（如：cDNA文库）。
（2）转基因过程中的核心步骤是① ，在此过程中使用的工具酶有 。鱼的抗冻蛋白基因必需插入到Ti质粒的 中才能整合到受体细胞的染色体DNA中，得到的结构Ⅰ上除了目的基因、标记基因外，还必须有 。
（3）步骤④～⑦应用了 技术，该技术的理论依据是 。其中⑤和⑥步骤分别叫做
和 。
【答案】（1）mRNA 逆转录酶（反转录酶） 基因组文库
（2）基因表达载体的构建 限制性核酸内切酶（限制酶）和DNA连接酶
丁一DNA启动子、终止子
（3）植物组织培养植物细胞全能性 脱分化再分化
【解析】
试题分析：（1）目的基因的获得可以采用反转录法，以mRNA为模板，通过逆转录酶催化合成DNA基因文库包括基因组文库和部分基因文库
（2）基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，需要用限制酶对目的基因和质粒进行切开后用DNA连接酶进行连接。Ti质粒上的T—DNA可以转移至受体细胞染色体的DNA上，因此目的基因要插入到T一DNA中。基因表达载体的组成除了目的基因、标记基因外，还必须有启动子和终止子以转录目的基因。
（3）步骤④⑦应用了植物组织培养技术，其理论依据是植物细胞全能性。其中④是脱分化形成愈伤组织，⑤为再分化形成幼苗。
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