Question

【题目】人心肌细胞中的肌钙蛋白由三个结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和 肌钙蛋白C（cTnC），其中肌钙蛋白I（cTnI）在血液中含量上升是心肌损伤的特异指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。

（1）细胞培养中，为防止有害代谢物的积累，可采用_________________的方法。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠一次，共注射三次，其目的是_________________，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的诱导因素是__________。

（2）甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是____________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得能产生___________________的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。

（3）酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图：

据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的_________结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是__________________，可通过测定产物量来判断待测抗原量。

（4）研究人员获得三种抗cTnI单克隆抗体，分别记为A、B、C。为检测哪两种单克隆抗体适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行_________组实验。

Answer 1

【答案】 定期更换培养液 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞 灭活的病毒（PEG） 乙和丙 特异性强、灵敏度高 不同部位 与待测抗原结合，酶催化检测底物反应 6

【解析】【试题分析】

本题以制备抗cTnI的单克隆抗体为载体，结合图解，考查制备单克隆抗体的相关知识，第（3）小题又设置了新的情境，考查考生的实验分析能力和识图能力，以及获取信息的能力。解答本题需要考生熟知制备单克隆抗体的流程、原理和单克隆抗体的优点，结合题意梳理回顾所学知识，对各小题进行解答。最后两道小题考生要根据从题图中获取的信息，再结合所学知识进行答题。

（1）细胞培养中，为防止有害代谢物的积累对自身造成危害，可采用定期更换培养液的方法，以便清除代谢产物。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠一次，共注射三次，其目的是加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞；诱导动物细胞融合常用的诱导因素是灭活的病毒（PEG）。

（2）图中①②依次表示单克隆抗体制备过程中的两次筛选，其中①第一次是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，②第二次是通过克隆化培养和抗体检测筛选出能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。因此，甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是乙和丙；②过程目的是筛选获得能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。

（3）据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是与待测抗原结合，酶催化检测底物反应，可通过测定产物量来判断待测抗原量。

（4）根据题意，为检测A、B、C中哪两种单克隆抗体适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行6组实验，检测并比较各组实验的产物量。