题目内容
【题目】桑椹酿酒使用的多为葡萄酒酵母菌。现科研人员从桑园中分离出发酵性能优良的专用桑樵酒酵母菌E44，并用葡萄酒酵母菌（CK）做对照，对其相关性能进行测定。分析回答下列问题：
（1）分离E44菌株的培养基一般需用______________灭菌，常用的分离方法是平板划线法和______________。研究发现，酿酒酵母菌不能以赖氨酸作为氮源，因此可将分离获得的酵母菌接种在____________________________的培养基上进行鉴定，结果发现菌株不能生长。
（2）普遍认为酵母菌的发酵能力与菌株对酒精的耐受性有关。为此，科研人员对E44菌株和CK菌株在不同酒精浓度下的死亡率进行了测定，由实验结果判断E44菌株的酒精耐受性更高，该结果的检测过程中先用次甲基蓝染色，再借助显微镜运用______________法计数后，计算出各菌株的死亡率。次甲基蓝可将死细胞染成蓝色，而活细胞不着色，原因是____________________________。
（3）为进一步确定E44菌株的发酵性能，科研人员分别测定并绘制了E44菌株和CK菌株的发酵性能曲线（如下图）。由图可知，第1d酵母菌降糖速率缓慢，酒精度增长较慢的原因是______________________。从第2d开始，糖度迅速下降，酒精度也较快增长的原因是____________________________。通过对比发现，E44菌株比CK菌株起酵快，发酵平稳，是优良的桑棋酒酿酒酵母菌种。
【答案】高压蒸汽灭菌法 稀释涂布平板法 以赖氨酸为唯一氮源 血细胞计数板（或显微镜直接计数） 细胞死亡，细胞膜不能控制物质进出（或失去选择透过性） 酵母正处于增殖阶段，以有氧呼吸为主，产生酒精较少 酵母菌进行无氧呼吸产生大量酒精
【解析】
分析题图可知，第一天酵母菌降糖缓慢，酒精度增长较慢，说明此时酵母菌正处于大量增殖阶段，以有氧呼吸为主，产生酒精较少。从第二天开始糖度迅速下降，酒精度也较快增长，进入发酵阶段，进行无氧呼吸，产生大量酒精。第五天之后糖度和酒精度趋缓，进入后发酵阶段。
（1）培养微生物的培养基一般需要用高压蒸汽灭菌法灭菌；常用的分离方法是平板划线法和稀释涂布平板法；酿酒酵母不能以赖氨酸作为氮源，因此，可以将分离获得的酵母菌接种在以赖氨酸为唯一氮源的培养基上进行鉴定，结果发现酿酒酵母不能生长；
（2）统计细胞数量用血细胞计数板；活细胞的细胞膜具有选择透过性，用次甲基蓝不能对活细胞染色，而能使死细胞染成蓝色；
（3）从图中可以看出，第1 d酵母菌降糖缓慢，酒精度增长较慢，说明此时酵母菌正处于大量增殖阶段，以有氧呼吸为主，产生酒精较少；从第2 d开始糖度迅速下降，酒精度也较快增长，进入发酵阶段，进行无氧呼吸，产生大量酒精。
