题目内容
【题目】放线菌是一类具有分枝菌丝的特殊菌群，其生长比一般细菌缓慢，在筛选中它的生长经常会受到快速生长菌的抑制，因此放线菌的分离筛选比较困难。自然界中绝大多数的抗生素都是放线菌产生的。回答下列问题：
（1）混合菌样品的预处理和培养条件是影响放线菌筛选的两个主要因素。常用到的预处理有加热、干燥、苯酚、强碱等，这说明放线菌相对于一般的细菌孢子，抗逆性___________。
（2）利用特殊的营养源，以及添加___________来抑制细菌生长从而选择培养放线菌也是常用的一种方法。另外，添加重铬酸钾的培养基也可以有效地抑制样品中的细菌和真菌。这两种方法用到的培养基都从功能上属于_________________________。
（3）初步筛选后的放线菌可用改良后的高氏一号培养基（可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0．5g，K2HPO4 0．5g，MgSO4 7H20 0．01g，蒸馏水1L，琼脂18g，pH7．2- 7．4）进行纯化培养，其中可溶性淀粉是放线菌生长的主要___________源，_____________是氮源。配制培养基时，灭菌与调pH的先后顺序是________________。
（4）对放线菌实现分离后，如需对其进行活菌计数，可采用______________法，在此方法中，当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个__________，来源于样品稀释液中的一个活菌。
【答案】强 抗生素 选择培养基 碳 KNO3 调pH在前，灭菌在后 稀释涂布平板 菌落
【解析】
1、从微生物的混合物中筛选目的微生物需要使用选择培养基，选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。
2、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
（1）混合菌样品的预处理和培养条件是影响放线菌筛选的两个主要因素。常用到的预处理有加热、干燥、苯酚、强碱等，这说明放线菌相对于一般的细菌孢子，抗逆性强。
（2）由于放线菌可以产生抗生素，因此利用特殊的营养源，以及添加抗生素来抑制细菌生长，从而选择培养放线菌是常用的一种方法。在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。这两种方法用到的培养基从功能上都属于选择培养基。
（3）高氏一号培养基中可溶性淀粉是放线菌生长的主要碳源，KNO3是氮源。配制培养基时，需要先调pH再灭菌，以免调pH时污染培养基。
（4）对放线菌实现分离后，如需对其进行活菌计数，可采用稀释涂布平板法，在此方法中，当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
【题目】大肠杆菌是国际上公认的卫生监测指示菌，用于指示食品、饮用水等是否直接或间接受到了粪便的污染。少数微生物能分解乳糖，有些只产酸（酸性物质），有些只产气（气体），而大肠杆菌既能产酸又能产气，且产生的酸性物质能与伊红美蓝反应而呈现黑色。某小组为检测某水体中大肠杆菌的污染状况，选用了如下两种培养基。
培养基名称 | 配方（L-1） | pH |
乳糖蛋白胨培养基 | 蛋白胨10g，乳糖5g，牛肉膏3g，NaCl 5g，溴甲酚紫0.016g | 7.4 |
伊红美蓝培养基 | 蛋白胨10g，乳糖10g，KH2PO4 5g，伊红0.4g，美蓝0.065g，琼脂15g | 7.4 |
回答下列问题：
（1）从物理性质上看，两种培养基的类型__________（填“相同”或“不同”）。在乳糖蛋白胨培养基中，为微生物的生长提供氮源的物质有__________；NaCl除了提供无机盐外，还具有_________作用。
（2）乳糖蛋白胨培养基进行灭菌时，不选用121℃高压灭菌15 min的方法，而是选用115℃灭菌20 min，推测可能的原因是___________。
（3）某小组取两支含乳糖蛋白胨培养基的试管A和B，A管中加入1mL待测水样，B管不作处理，然后都放入培养箱中培养24h。已知溴甲酚紫在酸性时呈黄色，碱性时（pH高于6.8）呈紫色。若出现_________时，则提示水样可能被大肠杆菌污染。
（4）该小组为计数大肠杆菌的数目，同时还各取0.1 mL水样直接涂布到三个伊红美蓝平板培养基上进行培养，分别统计平板上的菌落数为34、36、38，估算出每毫升水样中含360个大肠杆菌。有同学指出，估算的大肠杆菌数目不可信，其原因有___________、__________。