Question

【题目】对艾滋病的疫苗研究，经历了三个“时代”．早期，科学工作者从HIV感染自愈者体内采取相应免疫细胞，使之与骨髓瘤细胞结合，生产HIV的抗体，具体过程见下图1：

（1）上述过程①的生物技术称为_____技术；

（2）要获得纯净、单一的抗体，上图过程最关键的操作要点是_____．

随后，转基因技术被运用到了HIV的疫苗的研制工作中，科学工作者研制的第二代HIV疫苗的操作简要路径见下图2：

（3）过程②所用限制酶必须一致，其理由是_____。

（4）用该方法产生的疫苗进行接种，与上述图1的抗体注射方法的免疫功能相比，其关键的优势是_____；

（5）该疫苗接种，具有一定的HIV防疫作用，但不能治愈HIV感染者，从免疫学角度分析，不能治愈的主要原因是_____。

用X、Y两种限制酶作用于病毒DNA片段，并进行电泳分析，其结果见图3．

（6）A至D选项中，关于两种酶切位置的判断正确的是_____

科学工作者发现一种蛋白质（D4﹣Ig），它能与HIV表面的糖蛋白结合，从而使HIV失去侵染T细胞的能力；腺相关病毒是杆状病毒，无激活复制基因，对人体相对安全。

腺相关病毒其基因组中含有常用病毒衣壳基因rep和复制相关蛋白基因cap，为安全起见，需要去除复制基因．目前，科学家利用其相关实验研究，实验工作相关信息如图4：

（7）目的基因运载体是_____．

（8）过程①需要对D4﹣Ig蛋白进行_____，才能人工合成D4﹣Ig基因．这个过程产生的基因组可能在某些碱基上有所不同，其原因是_____

（9）被两种病毒双重感染的T细胞解体的HIV病毒相比入侵时的差异是_____。

Answer 1

【答案】细胞融合 单个免疫B细胞与重骨髓瘤细胞融合或在选择培养基上进行选择 只要切口和接口具有相同的粘性末端即可 血液中抗体含量因代谢会逐渐降低，而抗原可以激发B细胞产生记忆细胞，较长时间维持较高抗体浓度 HIV寄生于细胞内，抗体只能应对内环境体液中的病毒 C 腺相关病毒（或腺相关病毒粒子和腺相关病毒基因组） 氨基酸种类与序列测定 有些氨基酸会有2种以上的密码子 HIV病毒的衣壳蛋白已经与D4﹣Ig蛋白结合，失去再感染T细胞能力

【解析】

（1）上①为HIV自愈者免疫细胞与骨髓瘤细胞融合的过程，采用细胞融合技术。

（2）获得纯净、单一的抗体，关键是单个免疫B细胞与重骨髓瘤细胞融合或在选择培养基上进行选择。

（3）②是基因表达载体的构建过程，外源DNA片段和质粒需用同种限制酶切割，以产生相同的黏性末端，切口和接口具有相同的黏性末端时即可被DNA连接酶连接。

（4）疫苗接种比抗体注射的优势在于血液中抗体含量因代谢会逐渐降低，而抗原可以激发B细胞产生记忆细胞，较长时间维持较高抗体浓度。

（5）HIV病毒寄生于细胞内，抗体只能清除内环境体液中的病毒，该疫苗接种具有一定的HIV防疫作用，但不能治愈HIV感染者。

（6）用X酶单独切割能形成500、5000和4500三种大小的片段，这与图3不符，A错误。

用Y酶单独切割能形成500和9500两种大小的片段，这与图3不符，B错误。

C、用X酶单独切割能形成3500、6000和500三种大小的片段，用Y酶单独切割能形成8000和2000两种大小的片段，用X酶和Y酶同时切割能形成4500、3500、1500和500四种大小的片段，这与图3相符，C正确。

用Y酶单独切割能形成1500和8500两种大小的片段，这与图3不符，D错误。

故C。

（7）由图可知，目的基因运载体是腺相关病毒。

（8）过程①是采用人工合成法获得目的基因，需要对D4﹣Ig蛋白进行氨基酸种类与序列测定才能人工合成D4﹣Ig基因。由于密码子具有简并性，有些氨基酸会有2种以上的密码子，合成基因组可能在某些碱基上有所不同。

（9）“蛋白质（D4﹣Ig），它能与HIV表面的糖蛋白结合，从而使HIV失去侵染T细胞的能力”，因此被两种病毒双重感染的T细胞解体的HIV病毒相比入侵时的差异是HIV病毒的衣壳蛋白已经与D4﹣Ig蛋白结合，失去再感染T细胞能力。