Question

【题目】回答下列有关动物细胞工程的问题：

（1）动物细胞培养需要充足的营养、适宜的温度和pH 、______________的环境和一定的气体环境等条件。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的________________。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_______。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，可用_____________处理。

（2）克隆动物的培育体现了 ________________的全能性，使用的供体细胞一般都是传代10代以内的细胞，以保持细胞 __________________。

（3）单克隆抗体制备过程中，B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合常用___________作为动物特有的诱导因素。对经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行_______________，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

Answer 1

【答案】无菌、无毒 接触抑制 单层 胰蛋白酶 动物体细胞核 正常的二倍体核型 灭活的病毒 克隆化培养和抗体检测

【解析】

1、动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2~7.4。④气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

（1）动物细胞培养需要充足的营养、适宜的温度和pH、无菌、无毒的环境和一定的气体环境等条件。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制。此时，瓶壁上形成的细胞层数是单层。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，可用胰蛋白酶处理。
（2）克隆动物的培育主要采用了核移植技术，这体现了动物细胞核的全能性；由于传代10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型，因此使用的供体细胞一般都是传代10代以内的细胞。
（3）单克隆抗体制备过程中，B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合常用灭活的病毒作为诱导因素。经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量杂交瘤细胞，既能分泌特异性抗体，又能无限繁殖。