Question

【题目】某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计单位体积内的活菌数目。按照培养基的配方称取，并将各种物质溶解后，用蒸馏水定容、灭菌，制成固体培养基备用。回答问题：

（1）在配制培养基时，需加入___________作为唯一的氮源，该培养基从功能上看属于________培养基，配制好的培养基应用_____________法灭菌。

（2）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是

____________________________________________。

（3）若要统计土壤样品中尿素分解菌的数目，宜采用____________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中的活菌数。一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为24.6，则每毫升样品中的活菌数是（所用稀释液的体积为0.2mL）

___________________________________________。

（4）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

Answer 1

【答案】 尿素 选择 高压蒸汽灭菌 将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 稀释涂布平板 1.23×106 灭菌

【解析】本题考查微生物培养，要求考生掌握分离和计数微生物的方法，知道选择培养基的功能，掌握无菌技术及其应用。

（1）要分离土壤中能分解尿素的细菌，在配制培养基时，需加入尿素作为唯一的氮源，由于该培养基能将分解尿素的细菌选择出来，因此该培养基从功能上看属于选择培养基，培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。

（2）要检测固体培养基是否被污染，应将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生，若有菌落产生则说明该培养基已经被污染，否则没有被污染。

（3）要统计土壤样品中尿素分解菌的数目，宜采用稀释涂布平板法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中的活菌数。若一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为24.6，所用稀释液的体积为0.2mL，则每毫升样品中的活菌数是24.60.2×104=1.23×106。

（4）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散，污染环境。