题目内容
【题目】请回答微生物的培养和应用的有关问题
尿素是一种重要的农业氮肥，但是，尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某研究人员尝试从土壤中对分解尿素的微生物进行分离与计数。
【1】分解尿素的微生物中含有的酶是______________；为筛选出能分解尿素的微生物，配制培养基时应以______________作为唯一氮源，因此该培养基属于______________培养基。
【2】该培养基在接种前应该用______________法灭菌。
【3】对初步筛选得到的分解尿素的微生物进行纯化并计数，常用来统计样品中活菌数目的方法是____________________________。在接种前，随机取若干菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是__________________________________________。
【答案】
【1】 脲酶 尿素 选择
【2】高压蒸汽灭菌法
【3】 稀释涂布平板法 检测培养基平板灭菌是否合格
【解析】
本题主要考查微生物的筛选与分离，尿素分解菌的筛选等知识。从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。筛选尿素分解菌应该使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，配制培养基的一般操作是配制培养液、调整pH、分装、包扎、灭菌、搁置斜面。微生物的计数常用稀释涂布平板法接种，采用固体平板培养细菌时，要将培养皿倒置。
【1】尿素分解菌能够合成脲酶，脲酶能够将尿素分解为氨和二氧化碳。筛选尿素分解菌需要使用以尿素作为唯一氮源的选择培养基。
【2】培养基需要使用高压蒸汽灭菌法灭菌。
【3】微生物计数通常使用显微镜直接计数法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法属于活菌计数法。检测培养基灭菌是否合格，需要将灭菌后的空白平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生，如果没有菌落产生，那么培养基灭菌合格，否则不合格。
培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
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