题目内容
【题目】细胞融合技术有着广泛的应用,其中植物体细胞杂交要进行原生质体的融合,单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合。下图表示细胞融合的简略过程,请据图回答问题:
(1)若a、b分别表示白菜和甘蓝两种植物细胞的原生质体,则采用化学法形成c时,一般是用__________作为诱导剂。由d形成杂交植株的过程所依据的原理是____________________________。从本质上讲,“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是______________的结果。
(2)对于a、b所在的动物组织,通常用______________处理获得分散的单个细胞a、b。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在10代以内,以保持细胞正常的________________________。动物细胞融合的原理是____________________________。
(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成_______种类型的细胞d,因此需用特定的______________培养基筛选出______________细胞用于培养。
(4)临床使用的小鼠免疫后制备的鼠源性单抗体存在一些弊端,其中之一是会引起人体抗鼠源抗体反应。某病人连续隔周注射某种鼠源性单抗治疗一种病毒感染性疾病,开始病毒量明显减少,一段时间后,这种病毒量又开始上升,排除病毒变异的因素,上升原因还可能是人体产生了_________________________,使鼠源抗体不能发挥抗病毒的作用。研究人员应用____________________,改造了鼠源性抗体分子的结构,降低了鼠源性抗体的人体反应。
【答案】 聚乙二醇(或“PEG”) 植物细胞的全能性 基因的选择性表达 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 二倍体核型 细胞膜的流动性 三 选择 杂交瘤 抗鼠源性抗体的抗体,中和了鼠源性单抗 蛋白质工程
【解析】试题分析:分析题图,图示表示细胞融合的简略过程,其中植物体细胞杂交要进行原生质体的融合,再采用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株;单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合,再克隆化培养获得单克隆抗体。
(1)诱导原生质体融合时可采用化学法和物理法,采用化学法诱导时,一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。由d形成杂交植株的过程所依据的原理是植物细胞的全能性。从本质上讲,“白菜-甘蓝”杂种植株具有的性状是基因的选择性表达的结果。
(2)动物细胞培养时,需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织获得分散的单个细胞。10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型,因此目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在10代以内,动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性。
(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成三种类型的细胞d,即骨髓瘤细胞自身融合的细胞、B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合形成的杂交瘤细胞。因此需用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞用于培养。
(4)某病人连续隔周注射某种鼠源性单抗治疗一种病毒感染性疾病,开始病毒量明显减少,一段时间后,这种病毒量又开始上升,排除病毒变异的因素,上升的原因还可能是人体产生了抗鼠源性抗体的抗体,中和了鼠源性单抗,使鼠源性抗体不能发挥抗病毒的作用。改造鼠源性抗体分子的结构需要用蛋白质工程技术,改造后的鼠源性抗体分子可以降低鼠源性抗体的人体反应。
【题目】乳头瘤病毒(HPV)持续感染可导致宫颈癌发生。科研人员将HPV外壳L1蛋白基因与在人体中不能复制但能有效表达外源基因的痘苗病毒重组,制备新型疫苗。
(1)用痘苗病毒感染鸡胚细胞,一段时间后洗去吸附的病毒,将鸡胚细胞转入液体培养基中培养,培养基中加入适量抗生素以避免_____________。在培养基中加入L1蛋白基因与质粒连接构建的重组质粒,使L1蛋白基因与_____________在鸡胚细胞内发生DNA重组,得到重组病毒疫苗。依据L1基因序列设计引物扩增重组病毒DNA,以检测______________________。
(2)为研究重组疫苗的保护作用,将生长发育状况一致的小鼠随机均分为三组,1组注射用PBS缓冲液配制的重组病毒疫苗100μL,2组注射_____________作为对照,3组注射_____________作为空白对照。
(3)给上述三组小鼠皮下注射C3细胞(含有HPV基因的癌细胞),观察、记录小鼠成瘤情况,结果如下。
组别 | 各组平均瘤重(g) |
1 | 0.192 |
2 | 0.347 |
3 | 0.916 |
据实验结果分析,尽管各组小鼠都可成瘤,但实验组小鼠__________________________,说明重组病毒疫苗具有一定的免疫保护作用。接种重组病毒疫苗的小鼠体内表达_____________作为抗原,刺激机体产生特异性免疫。皮下注射C3细胞时,HPV引起_____________细胞迅速增殖、分化,产生大量抗体,从而起到免疫保护作用。根据免疫学知识,注射疫苗后,只有诱发出机体的_____________免疫,才能有效清除癌细胞。
(4)若欲检验重组病毒疫苗是否有治疗作用,对小鼠进行的处理最恰当的是_____________(选填下列字母)。
a.先注射HPV病毒,一段时间后注射重组病毒疫苗
b.先注射重组病毒疫苗,一段时间后再注射HPV病毒
c.先注射C3细胞,一段时间后注射重组病毒疫苗
d.先注射重组病毒疫苗,一段时间后再注射C3细胞