Question

（18分）pBR322质粒是基因工程中经常选用的工具，如图Ⅰ所示。

I．目的基因如果插入质粒的某抗性基因中，将使该基因失活。为了检查运载体是否导入原本无Amp^r和Tet^r的大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图Ⅱ的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图Ⅲ的结果（空圈表示与Ⅱ对照无菌落的位置）。
（1）．pBR322质粒在基因工程中的作用是            。
（2）．下图是pBR322质粒上被某种酶识别的一段特定序列。a处被切割后，产生的暴露出来的单链碱基序列是                                       。如果要从生物细胞中分离目的基因，首先需要进行基因定位，然后再用上述酶切割。将目的基因与质粒连接起来的酶作用于图中的       处。
（3）与图Ⅲ空圈相对应的图Ⅱ中的菌落表现型是                             ，由此说明目的基因插入了       中。
II．下面是pBR322质粒的部分碱基序列，所编码蛋白质的氨基酸序列为“甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—丙氨酸—天冬氨酸—缬氨酸…”（甲硫氨酸的密码子AUG也是起始密码子）。

则：①、②两单链作为转录模板链的是     （填序号），该链转录产生的mRNA顺序是AUG                                                 ；如图中箭头所指碱基对G/C缺失，该基因相应片段编码的氨基酸序列为                                      
                                                                    （ 4分）。

Answer 1

（18分，每空2分）I．（1）作为运载体        （2）． －TGCA或ACGT－     a
（3）．   能抗氨苄青霉素，但不能抗四环素     Tetr
II．② CGGGAGGCGGAUGUC…… 甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—精氨酸—甲硫氨酸…4分

解析