题目内容
【题目】【生物一选修1:生物技术实践】某研究性学习小组同学为了调查北江河中细菌的污染情况进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。
(1)实验中制备的牛肉膏蛋白胨培养基的部分成分列表如下
成分 | 牛肉膏 | 蛋白胨 | NaCl | 蒸馏水 |
含量 | 0.5g | 1g | 0.5g | 100ml |
表中各成分含量的比例确定的原则是_______________________。
(2)对培养基进行灭菌，通常采用的方法是__________。为了使培养基达到良好的灭菌效果，一般在压力为lOOkPa，温度为__________℃的条件下，维持15～30min。
(3)为了更好的对细菌计数，一般采用的接种方法是_____,该方法的操作是将菌液进行一系列的___,然后再分别__________到琼脂固体培养基的表面。
(4)接种后放在恒温箱培养一段时间后，为保证结果准确，选择菌落数在__________的平板进行计数。该组同学在菌落计数时发现，统计的菌落比实际数目要低，可能的原因是_______________。
【答案】根据所培养微生物对各营养成分的需求量（比例）高压蒸汽灭菌（答蒸气不得分）121℃稀释涂布平板法梯度稀释涂布（答接种不得分）30～300某些菌落可能是由两个或多个细菌连在一起形成（答有重叠菌落得分）
【解析】试题分析：（1）培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，各种成分的量根据所培养微生物对各营养成分的需求量来配置。
（2）常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。为了使培养基达到良好的灭菌效果，一般在压力为lOOkPa，温度为121℃℃的条件下，维持15～30min。
(3)为了更好的对细菌计数，一般采用的接种方法是稀释涂布平板法,该方法的操作是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后再分别涂布到琼脂固体培养基的表面。
(4)接种后放在恒温箱培养一段时间后，为保证结果准确，选择菌落数在30～300的平板进行计数。该组同学在菌落计数时发现，统计的菌落比实际数目要低，可能的原因是某些菌落可能是由两个或多个细菌连在一起形成。
