题目内容
【题目】某研究所根据植物“偏爱”的密码子设计,通过人工合成若干DNA片段,将其拼接成为人胰岛素基因,并将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下,通过农杆菌介导的方法转人番茄中,在番茄的果实中表达人胰岛素。并且在胰岛素一COOH端加上KDEL内质网滞留序列,避免胰岛素在植物细胞中的降解。回答下列问题:
(1)该科研所使用的人胰岛素基因是采用______________的方法获得。要想在体外获得大量该目的基因的片段,可以采用____________技术。该技术中使用的关键酶是________________________ 。
(2)根据上述描述,转基因操作时所用的载体是_____________________,载体上的________可以转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上。构建的基因表达载体中应含有的结构有CaMV35S启动子、终止子、复制原点、果实专一性启动子、____________________________________。
(3)如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用___________________技术。该技术中使用的基因探针也可以用来检测________________________ 。
(4)吃这种转基因番茄不能治疗人类的I型糖尿病(由体内胰岛素分泌不足引起),从人体相关生理分析原因可能是_____________________________________________。
【答案】 人工合成 PCR 热稳定性DNA聚合酶(或Taq酶) 农杆菌的Ti质粒 T-DNA 标记基因、目的基因 DNA分子杂交 目的基因是否转录出mRNA 胰岛素是蛋白质,易被消化道内蛋白酶水解成氨基酸,不能起到治疗的作用
【解析】试题分析:基因工程技术的基本步骤:1、目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定:(1)分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.(2)个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
(1)根据题干信息“某研究所根据植物“偏爱”的密码子设计,通过人工合成若干DNA片段,将其拼接成为人胰岛素基因”可知,上述基因工程操作是采用人工合成方法获得目的基因的。PCR技术可在体外大量扩增目的基因;由于PCR技术在较高的温度下进行,因此该技术中使用的关键酶是热稳定性DNA聚合酶(或Taq酶)。
(2)根据题干信息可知,该过程中采用了农杆菌转化法,其原理是农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点,如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。基因表达载体包括启动子、目的基因、标记基因和终止子。
(3)检测受体细胞中是否存在目的基因可采用DNA分子杂交技术.该技术中使用的基因探针也可以用来检测目的基因是否转录出mRNA。
(4)胰岛素是蛋白质,易被消化道内蛋白酶水解成氨基酸,不能起到治疗的作用,所以吃这种转基因番茄不能治疗人类的I型糖尿病(由体内胰岛素分泌不足引起)。
【题目】牵牛花的茎(对生长素的敏感性低)可以缠绕在其他物体上,如果测量幼茎靠近物体的一侧和远离物体的一侧的生长素浓度和细胞体积大小,你认为结果应该是
生长素浓度 | 细胞体积大小 | |||
靠近物体侧 | 远离物体侧 | 靠近物体侧 | 远离物体侧 | |
A | 高 | 低 | 小 | 大 |
B | 低 | 高 | 小 | 大 |
C | 高 | 低 | 大 | 小 |
D | 低 | 高 | 大 | 小 |
A. A B. B C. C D. D