题目内容
【题目】人类复合型免疫缺陷症患者体内缺失腺苷酸脱氨酶(ADA)的基因，导致体内缺乏腺苷酸脱氨酶。随着基因工程的不断发展，科学家利用基因治疗治愈了人类复合型免疫缺陷症，过程如下图所示。
回答下列问题：
(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，图中①代表的步骤是___________。
(2)图中③表示目的基因的检测与鉴定。检测ADA基因是否存在T细胞中，用PCR技术进行扩增时，应提取T细胞中的___________(填“mRNA”“总“RNA”或“DNA”)作为PCR模板，从而筛选出含ADA基因的T细胞。检测ADA基因是否转录时，未出现ADA基因转录的mRNA，从基因表达载体的构建角度推测，最可能的原因是___________。
(3)含ADA基因的T细胞必需要能产生___________，才能注入患者体内，达到治疗疾病的目的。这种治疗方法属于基因治疗，基因治疗是指___________。
(4)基因工程中常用的载体，除上图所示以外，还有___________和___________。
【答案】基因表达载体的构建 DNA 基因表达载体上目的基因首端未加入启动子(目的基因没有在启动子和终止子之间) 腺苷酸脱氨酶(ADA) 把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗的目的 质粒 λ噬菌体的衍生物
【解析】
基因治疗：把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。从图中可看出目的基因与病毒结合，由此可看出运载体是病毒，目的基因是腺苷酸脱氨酶（ADA）基因，最后将运载体导入到淋巴细胞，故受体细胞是T淋巴细胞。
（1）图中①代表的步骤是将目的基因和病毒结合，为基因表达载体的构建过程。
（2）检测ADA基因是否存在T细胞中，用PCR技术进行扩增时，应提取T细胞中的DNA作为PCR模板，从而筛选出含ADA基因的T细胞。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，可驱动基因开始转录，检测ADA基因是否转录时，未出现ADA基因转录的mRNA，最可能的原因是基因表达载体上目的基因首端未加入启动子。
（3）基因治疗是指把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗的目的。人类复合型免疫缺陷症患者体内缺失腺苷酸脱氨酶(ADA)的基因，导致体内缺乏腺苷酸脱氨酶。进行基因治疗时含ADA基因的T细胞必需要能产生腺苷酸脱氨酶（ADA），才能注入患者体内，达到治疗疾病的目的。
（4）基因工程中常用的载体有质粒，动植物病毒，λ噬菌体衍生物。
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