题目内容
【题目】Ⅰ.某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株。请回答:
(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以______为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于______培养基。
(2)为避免培养皿污染,需将培养皿呈______状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行______处理。
(3)为了排除______,需设置接种______的培养基作为空白对照。
(4)为了筛选出菌株,可将适量的______试剂滴加在平板中的菌落周围,洗去浮色后,如果菌落周围的现象是______,则说明此种菌能够分泌脂肪酶。
(5)纯化菌种时,为了得到单菌落,可采用______法接种于新的平板上,然后用接种环挑取单菌落至空白斜面,最后置于______中保存。
Ⅱ.天津独流老醋历史悠久、独具风味,其生产工艺流程如下图。
(1)在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度,这是因为酶_____________________。
(2)在酒精发酵阶段,需添加酵母菌。在操作过程中,发酵罐先通气,后密闭。通气能提高________的数量,有利于密闭时获得更多的酒精产物。
(3)在醋酸发酵阶段,独流老醋采用独特的分层固体发酵法,发酵30天。工艺如下:
①发酵过程中,定期取样测定醋酸杆菌密度变化,趋势如图。据图分析,与颠倒前相比,B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是____________________,由此推测,影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是____________________(不止一个)。
②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中,发酵缸中_______________层的醋醅有利于乳酸菌繁殖,积累乳酸。
③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少,主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的改变,加剧了不同种类乳酸菌的__________,淘汰了部分乳酸菌种类。
【答案】 豆油 选择 倒置 稀释 过程中的杂菌干扰 等量无菌水 苏丹Ⅲ 透明圈 划线分离(涂布分离) 冰箱 在最适温度条件下催化能力最强 酵母菌 先快速增长后趋于稳定 氧气、营养物质、pH 颠倒前的B层和颠倒后的A(或不翻动,或下) 种间竞争(或竞争)
【解析】试题分析:培养基的营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐;常用灭菌方法:灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法;接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。参与果酒制作的微生物是酵母菌,其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型;参与果醋制作的微生物是醋酸菌,其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理:当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。
Ⅰ.(1)欲筛选出能降解豆油的菌株,培养基中应只含有豆油而无其它碳源,不能降解豆油的细菌在此培养基上不能生存,从功能上讲,这类培养基属于选择培养基。
(2)为避免培养皿污染,需将培养皿呈倒置状态放置;为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行梯度稀释处理。
(3)为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。
(3)由于脂肪遇苏丹Ⅲ或者苏丹Ⅳ试剂会出现橘黄色或者红色,所以为了筛选出菌株,可将适量的苏丹Ⅳ试剂滴加在平板中的菌落周围,洗去浮色后,如果菌落周围的现象是出现透明圈、不出现橘黄色或红色圈,则说明此种菌能够分泌脂肪酶。
(4)分离纯化菌种时,需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便纯化菌种。纯化后的菌种应该置于冰箱中保存。
Ⅱ.(1)分析流程图可知,糖化阶段就是淀粉在淀粉酶以及麦芽糖酶的作用下水解产生葡萄糖,由于在最适温度条件下酶的活性最强,因此在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度。
(2)酵母菌属于兼性厌氧型微生物,即在有氧呼吸的条件下能够大量繁殖,在无氧呼吸条件下无氧呼吸产生酒精。因此在酒精发酵阶段,发酵罐先通气,后密闭;通气的目的是提高酵母菌的数量,有利于密闭时获得更多的酒精产物。
(3)①醋酸菌属于需氧型细菌,只有在氧气充足的时候能够大量繁殖并能产生醋酸。据图3分析,与颠倒前相比,B层醋酸杆菌密度先快速增长后趋于稳定,变化的主要环境因素是氧气、营养物质、PH。
②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因,酸发酵是乳酸菌进行的无氧呼吸,因此发酵过程中,发酵缸中颠倒前的B层和颠倒后的A(或不翻动,或下)层醋醅有利于乳酸菌繁殖,积累乳酸。
③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少,主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化,加剧了不同种类乳酸菌的种间竞争(或竞争),淘汰了部分乳酸菌种类。
【题目】【生物一选修1:生物技术实践】
牛奶中富含蛋白质,长期饮用有助于增强体质,但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。以下是牛奶消毒及消毒后的细菌检测。
(1)图中步骤①称为__________消毒法,步骤②是__________。
(2)检测过程进行步骤③搡作时,应选用下图中的哪种工具_______________。为了避免杂菌污染,此处应在__________附近进行。
(3)将接种后的培养基和作为对照的______________同时放入37℃恒温培养箱中,培养36小时。取出后统计各平板的菌落数,结果如表所示。
牛奶稀释倍数 | 10-2 | 10-3 | 10-4 |
平板1菌落数 | 87 | 10 | 1 |
平板2菌落数 | 83 | 12 | 1 |
平板3菌落数 | 85 | 10 | 0 |
应该选择其中稀释倍数为__________的平板进行计数,经过消毒后的牛奶中,细菌数大约是__________个/mL。不同种微生物的菌落在_________等方面表现出的特点,可作为分类依据(写出2种。)