Question

【题目】米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图。

（1）农杆菌中合成的铁合蛋白与动物细胞中的铁合蛋白完全相同，这一现象说明__________。

（2）为了筛检成功导入重组质粒的农杆菌，1号培养基需要________________。诱导组织细胞失去分化的培养基是________号培养基。

（3）让农杆菌侵入愈伤组织而非水稻胚与幼苗。其主要原因有__________

A. 胚与幼苗中导入重组质粒的细胞较难发育成完整转基因植株

B.愈伤组织细胞膜因为损伤较多而有利于接受重组质粒

C.3号培养基的作用主要是促进愈伤组织的细胞接受重组质粒

D.转基因水稻植株须由转基因细胞分裂与分化而形成

（4）⑤至⑥的过程，属于_________________技术。

下图为质粒、含目的基因的DNA及其有关限制酶的作用位点，

（5）为提高实验的效能，应采用限制酶____________处理Ti质粒和含目的基因的DNA；限制酶作用于DNA分子的________________________之间的化学键。

对Ti质粒采用相关限制酶完全酶切后的DNA片段长度如下表；

（6）若独立用EcoRⅡ完全酶切，能得到的DNA片段数（不定向组合）及其长度是是________

A.6Kb、44Kb B.22Kb、22Kb、6Kb C.22Kb、28Kb D.12Kb、38Kb

Answer 1

【答案】不同生物细胞共有一套遗传密码子 加入潮霉素 2 AD 组织培养 BamHI和hindIII 磷酸与脱氧核糖 AC

【解析】

基因工程的一般操作步骤有：目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达。其中获取的目的基因常用PCR技术进行扩增；基因工程的工具酶有限制酶和DNA连接酶，通常要用同一种限制酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段，然后再用DNA连接酶连接成重组质粒，在植物基因工程中，常利用植物的组织培养技术将植物受体细胞培养为完整植株，此过程中生长素和细胞分裂素的比例至关重要。

图中①为基因表达载体的构建，②为将重组质粒导入农杆菌，③为筛选目的基因过程，④为脱分化，⑤⑥为植物组织培养过程。

（1）由于不同生物细胞共有一套遗传密码子，故农杆菌中合成的铁合蛋白与动物细胞中的铁合蛋白完全相同。

（2）由于质粒中含有潮霉素抗性基因，故为了筛检成功导入重组质粒的农杆菌，1号培养基需要加入潮霉素，能生长则说明已经导入质粒；2号培养基的目的是经脱分化形成愈伤组织，故诱导组织细胞失去分化的培养基是2号培养基。

（3）让农杆菌侵入愈伤组织而非水稻胚与幼苗，其主要原因是胚与幼苗中导入重组质粒的细胞只是部分细胞，较难发育成完整转基因植株；而愈伤组织形成转基因细胞后则可通过分裂和再分化形成转基因植株。

故选A。

（4）据图示可知，⑤至⑥的过程，属于组织培养技术。

（5）由于EcoRⅠ会破坏目的基因，应采用限制酶BamHI和hindIII处理Ti质粒和含目的基因的DNA，以防止自身环化；限制酶作用于DNA分子的磷酸与脱氧核糖之间的磷酸二酯键。

（6）由于EcoRⅠ切割后的片段为50，EcoRⅠ+EcoR切割后的片段为22+22+6，若独立用EcoRⅡ完全酶切，其中间的两段则不会分割，即可能是22+22或22+6，故能得到的DNA片段数应为44+6或28+22。

故选AC。