Question

3．研究发现，将心肌细胞直接移植到心脏受损部位能够改善心脏功能，这是一种治疗缺血性心脏病的有效方法．胚胎干细胞（ESC）在体外能被诱导分化为心肌细胞，但刷时会产生大量非心肌细胞．科研人员利用基因工程技术，使增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因在心肌细胞特异性表达，以利于从ESC分化产生的细胞中筛选出心肌细胞．该基因工程技术基本流程如图．请结合上述材料同答下列问题．

（1）过程①中，利用限制酶MluⅠ、NheⅠ处理以获得α-MHC启动子．
（2）过程②的目的是使EGFP基因在心肌细胞中特异性表达．
（3）将表达载体2导入ESC中，常利用显微注射技术．
（4）进行过程④后，若检测到发出绿色荧光细胞，则该细胞为心肌细胞．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：①过程表示获取目的基因，②过程表示基因表达载体的构建，③表示从囊胚中分离出胚胎干细胞，④表示细胞的增殖分化．

解答 解：（1）过程①中，利用限制酶MluⅠ、NheⅠ处理以获得α-MHC启动子，使得α-MHC基因在心肌细胞中能转录．
（2）过程②表示基因表达载体的构建，目的是使EGFP基因在胚胎干细胞中稳定存在，并在心肌细胞中特异性表达．
（3）过程③中，从囊胚分离出内细胞团，具有发育的全能性，属于胚胎干细胞，进行培养可获得ESC．因此，将表达载体2导入ESC中，常利用显微注射技术．
（4）进行过程④后，若检测到发出绿色荧光细胞，则该细胞为心肌细胞．
故答案为：
（1）α-MHC启动子
（2）EGFP  心肌
（3）显微注射
（4）发出绿色荧光

点评 本题考查基因工程、胚胎干细胞等相关知识，意在考查学生的识图和分析能力，难度不大．