Question

在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan^r）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．如图为获得抗虫棉的技术流程．

请据图回答下面的问题．
（1）A过程需要的酶有

 

、

 

．
（2）质粒多存在于细菌中，它是能自我复制的

 

（3）B过程及其结果体现了质粒作为载体必须具备的两个条件是：

 

，

 

．
（4）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入

 

（5）科学家在实验过程中，是将抗虫基因导入离体的棉花体细胞进行组织培养；也可以将抗虫基因导入植物的

 

细胞中，让其直接发育成新个体．
（6）为确定抗虫棉是否培育成功，既要用放射性同位素标记的

 

作探针进行分子水平上的检测，又要在个体水平上鉴定，后者的具体过程是

 

．
（7）图示将目的基因导入受体细胞的方法是

 

，将目的基因导入动物细胞和微生物细胞则常采用

 

 法和

 

法．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析题图：图示为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图，其中A表示基因表达载体的构建过程；B表示用选择培养基筛选含有重组质粒的土壤农杆菌的过程；C表示脱分化过程；D表示个体水平上的检测．

解答： 解：（1）图中A为基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．
（2）质粒是能自我复制的小型环状DNA分子．
（3）B过程是培养并选择含有重组质粒的土壤农杆菌，其中“选择”体现了质粒作为运载体必须具备具有标记基因；“培养”体现了质粒作为运载体必须能在宿主细胞中复制并稳定保存．
（4）由图可知，标记基因时卡那霉素抗性基因，因此可用含有卡那霉素的培养基筛选含有抗虫基因的再生植株．
（5）若将抗虫基因导入植物的受精卵细胞中，可让其直接发育成新个体．
（6）为确定抗虫棉是否培育成功，既要用放射性同位素标记的目的基因作探针进行分子水平上的检测，又要在个体水平上鉴定，即让棉铃虫采食棉花叶片观察存活情况．
（7）图中将目的基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞常采用Ca²⁺处理（感受态细胞）法．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶   DNA连接酶
（2）小型环状DNA
（3）具标记基因     能在宿主细胞中复制并稳定保存
（4）卡那霉素
（5）受精卵
（6）目的基因    让棉铃虫采食棉花叶片观察存活情况
（7）农杆菌转化法    显微注射    Ca²⁺处理（感受态细胞）

点评：本题结合转基因抗虫植株的培育过程图，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，能准确判断图中各过程的名称；识记植物组织培养的过程及应用，能结合图中信息答题．