Question

7．关于凝胶色谱柱的装填，除哪项外均为正确解释（　　）

• A． 交联葡聚糖凝胶（G-75）“G”表示凝胶的交联程度，膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值
• B． 凝胶用自来水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液
• C． 用300ml的物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12h
• D． 色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装

Answer 1

分析 凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离．
装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，因为气泡会扰乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果．

解答 解：A、交联葡聚糖凝胶（Sephadex G-75）“G”表示凝胶的交联程度，膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸水7.5克，A正确；
B、在配制凝胶悬浮液时，凝胶应用蒸馏水充分溶胀，B错误；
C、装填完后，需用300 mL的物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液（pH=7.0）充分洗涤平衡凝胶12小时，使凝胶装填紧密，C正确；
D、色谱柱内不能有气泡，一旦发现气泡，必须重装，D正确．
故选：B．

点评 本题考查了生物技术与实践的相关实验，意在考查学生是理解和应用能力，对色谱柱装填的方法及蛋白质分离方法的记忆和综合应用是本题考查的重点．