Question

10．为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注．我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系．请据图回答：
（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的a处，DNA连接酶作用于a处．（填“a”或“b”）
（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法．
（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用植物组织培养技术，该技术的核心是脱分化和再分化．
（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的耐盐基因做探针进行分子杂交检测，又要用一定浓度的盐水浇灌方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：a处为磷酸二酯键，b处为氢键，限制酶作用于磷酸二酯键，而不是氢键；把表达载体导入受体细胞的方法对于动物、植物、细菌是不一样的，这里要区分清楚；最后一步在鉴定时可以用DNA分子杂交法，抗原抗体杂交法，还有特性验证试验法，最简单的就是移植到盐碱地中看是否具有抗性．

解答 解：（1）图中a表示磷酸二酯键，是限制酶的切割位点，也是DNA连接酶的连接位点；b表示氢键，是解旋酶的作用位点．
（2）将重组DNA分子导入植物细胞的常用方法有农杆菌转化法、基因枪法或花粉管通道法．
（3）将细胞培养成植株需要利用植物组织培养技术，该技术的主要步骤是脱分化和再分化，原理是植物细胞具有全能性．
（4）要确定耐盐转基因水稻是否培育成功，从分子水平上，需要用放射性同位素标记的耐盐基因做探针进行分子杂交检测；从个体水平上，又要用一定浓度的盐水浇灌方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性．
故答案为：
（1）a    a 
（2）农杆菌转化    基因枪    花粉管通道
（3）植物组织培养    脱分化    再分化
（4）耐盐基因（目的基因）    一定浓度的盐水浇灌（移裁到盐碱地中）

点评 本题考查基因工程和植物细胞工程的相关知识，意在考查考生的识记能力，属于难度不大．