Question

9．如图所示动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线（图中B、D两点表示经筛选后继续培养），请据图回答：
（1）动物细胞培养技术的原理是细胞增殖．AB段可能发生了接触抑制现象．
（2）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞．进行细胞培养时，必须首先用胰蛋白处理内细胞团，使之分散成单个细胞．
（3）为制备单克隆抗体，需将特定抗原注射到小鼠体内，以此获取B淋巴细胞细胞，同时可选取图中D点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞．为筛选能够产生单克隆抗体的杂交细胞，至少需要经过2次筛选才能达到目的．

Answer 1

分析 本题考查动物细胞培养的相关知识．
1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．
2、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．

解答 解：（1）动物细胞培养的目的为了获得细胞和细胞产物，则原理是细胞增殖．当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，即会发生接触抑制现象，图中AB段停止增殖，可能发生了接触抑制现象．
（2）进行动物细胞培养时，必须首先用胰蛋白处理内细胞团，使之分散成单个细胞．
（3）为制备单克隆抗体，需将特定抗原注射到小鼠体内，以此获取B淋巴细胞，同时可选取图中D点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞，因该点细胞已癌变．为筛选能够产生单克隆抗体的杂交细胞，至少需要2次筛选才能达到目的，第一次筛选获得杂交瘤细胞，第二次筛选获得能产生抗体的杂交瘤细胞．
故答案为：
（1）细胞增殖            接触抑制             
（2）胰蛋白       
（3）B淋巴细胞   D      2

点评 本题考查动物细胞的培养与单克隆抗体的制备，意在考察考生对生物学知识的理解能力和综合分析能力，难度适中．