Question

6．制备单克隆抗体的过程中，需筛选出杂交瘤细胞．一般情况下，细胞内DNA合成除了主要途径以外还有一条辅助途径，而骨髓瘤细胞没有此辅助途径，DNA合成的主要途径可以被氨基碟呤阻断，利用这一特性可以筛选出杂交瘤细胞．
（1）制备单克隆抗体时，选用B淋巴细胞的原因是B淋巴细胞能产生抗体，选用骨髓瘤细胞的原因是骨髓瘤细胞可以无限增殖．研究发现，被激活的B淋巴细胞内含有发达的粗面内质网，这与产生大量的抗体的功能相适应．
（2）加入适量氨基碟呤的培养基称为选择 培养基，氨基喋呤的作用主要是为了淘汰骨髓瘤细胞及自身融合的骨髓瘤细胞．
（3）诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合常用的化学试剂是PEG．对杂交瘤细胞进行体外培养需要适CO₂，CO₂的作用是维持培养液的PH值．

Answer 1

分析 1．制备单克隆抗体的诱导过程有：正常小鼠免疫处理、动物细胞的融合（物、化、生法）、杂交瘤细胞的筛选与培养、专一抗体检验阳性细胞培养、单克隆抗体的提纯．
2．单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞．利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞．第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞．
3．杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体．

解答 解：（1）具有免疫能力的B淋巴细胞能产生抗体，因此制备单克隆抗体时选用B淋巴细胞．由于骨髓瘤细胞可以无限增殖，因此选用骨髓瘤细胞．效应B细胞能合成并分泌抗体，并需要粗面型内质网加工和高尔基体的进一步加工和运输，所以细胞内含发达的内质网和高尔基体．
（2）加入适量氨基碟呤的培养基为选择性培养基．根据题干“细胞内DNA合成除了主要途径以外还有一条辅助途径，而骨髓瘤细胞没有此辅助途径，DNA合成的主要途径可以被氨基碟呤阻断”，可以获知：骨髓瘤细胞及自身融合的骨髓瘤细胞在含有氨基喋呤的培养基上不能存活，但杂交瘤细胞可以存活，因此氨基喋呤的作用主要是为了淘汰骨髓瘤细胞及自身融合的骨髓瘤细胞．
（3）诱导细胞融合常用的化学试剂是PEG．对杂交瘤细胞进行体外培养需要适CO₂，CO₂的作用是维持培养液的PH值．
故答案为：
（1）B淋巴细胞能产生抗体    骨髓瘤细胞可以无限增殖     产生大量的抗体
（2）选择       骨髓瘤细胞及自身融合的骨髓瘤细胞
（3）PEG     维持培养液的PH值

点评 本题考查了单克隆抗体的制备的相关知识，要求考生能够识记单克隆抗体制备的流程、原理、筛选目的以及杂交瘤细胞、单克隆抗体的特点和应用等知识，难度适中．