Question

人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

（1）htPA基因与载体用_________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_________技术。
（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要经过__________，才具备受精能力。
（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的__________。
（4）若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到__________，说明目的基因成功表达。

Answer 1

（1）同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）  DNA分子杂交 （或核酸探针）
（2）超数排卵  获能
（3）显微注射法  性别鉴定   全能性
（4）htPA（或人组织纤溶酶原激活物）

解析（1）构建重组表达载体时，要用同种限制性核酸内切酶，对目的基因与载体切割，再通过DNA连接酶连接。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交技术。
（2）促性腺激素能促进性腺产生卵母细胞，对供体母羊注射促性腺激素，可获取更多的卵（母）细胞，超数排卵。刚采集的精子没有受精能力，需要经过获能，才具备受精能力。
（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是显微注射法。药用蛋白可在转htPA基因母羊的羊乳中获得，为获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定。早期胚胎细胞具有全能性，利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体。
（4）目的基因是否成功表达的依据是看能否获得由目的基因控制合成的蛋白质。
【考点定位】
本题考查基因工程与胚胎工程的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容。能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。