Question

7．炭疽杆菌能使人畜患炭疽病，主要引起皮肤炭疽和肺炭疽等．对炭疽病疑似患者，可通过甲图所示鉴定炭疽杆菌的实验进行确诊，其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌．

（1）炭疽杆菌在细胞结构上无（“有”或“无”）成形细胞核，根据炭疽病的发病部位，你猜测炭疽杆菌的代谢方式应为异养需氧型．
（2）若要从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌，可将患者皮肤脓胞渗出物接种于特定的固体培养基表面，如乙图所示．图中A和D所示的接种方法分别叫：稀释涂布平板法和平板划线法．
（3）甲图中制备的液体培养基时需采取高压蒸汽灭菌法灭菌．甲乙两图中的各组培养基中都必须含有的营养成分有水、无机盐、碳源、氮源．接种可疑菌后，需将三角瓶置于35℃下的摇床上振荡培养24小时，可疑菌会大量繁殖，液体培养基变浑浊．
（4）甲图中，对照组与实验组试管同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低（高/低），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．此判断的依据是实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌死亡，溶液变澄清．

Answer 1

分析 1、培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子；
2、无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌；
3、微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法．

解答 解：（1）炭疽杆菌属于原核生物，因此细胞没有没有成形细胞核；根据炭疽病的发病部位，“引起皮肤炭疽和肺炭疽”，由此可以确定，炭疽杆菌的代谢方式应为异养需氧型．
（2）稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分布涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养．由图中四种菌落分布情况可知，A、B和C是采用稀释涂布平板法得到的，而D是采用平板划线法得到的．
（3）培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌．甲乙两图中的各组培养基中都必须含有的营养成分有水、无机盐、碳源、氮源．
（4）对照组试管中应加入等量生理盐水，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．此实验依据的原理是实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌死亡，溶液变澄清．
故答案为：
（1）无     异养需氧型
（2）稀释涂布平板法     平板划线法
（3）高压蒸汽灭菌     碳源、氮源
（4）低     实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌死亡，溶液变澄清

点评 本题考查微生物分离和培养等相关知识，要求考生能够掌握原核细胞的结构特点，掌握微生物分离和纯化的两种方法，能够根据题干信息确定炭疽杆菌的代谢类型，再结合所学知识准确答题．