Question

下图为转基因抗病香蕉的培育过程流程图，其中质粒上的Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等四种限制酶的识别序列及切割位点见下表．请据图回答下列问题：

（1）形成重组质粒A时，应选用限制酶

 

，对

 

进行切割．
（2）一个质粒被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同时切割后可得到

 

个DNA片段，

 

个黏性末端．
（3）培养基中的氨苄青霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使重组质粒A中含有

 

基因．
（4）要培养既抗病又无病毒的香蕉植株，应将农杆菌导入

 

细胞中．再进行植物的组织培养．
（5）以上获得转基因抗病香蕉植株的过程中，所用到的原理有

 

．

Answer 1

考点：基因工程的应用

专题：

分析：题图为转基因抗病香蕉的培育过程．含有目的基因的外源DNA分子含有EcoR I、Pst l、Sma I酶切位点，其中Sma I切割位点位于目的基因中；质粒中含有EcoR I、Pst l、Sma I、Apa I酶切位点，其中EcoR I、Pst l切割后形成的是黏性末端，而Sma I、Apa I切割后形成的是平末端．将香蕉组织块培养成香蕉需采用植物组织培养技术，图中①是脱分化过程，②是再分化过程．同时利用植物分生组织（如根尖、茎尖、芽尖等）培养可以获得无毒苗．

解答： 解：（1）由图可知，含有目的基因的外源DNA分子含有EcoR I、Pst l、Sma I酶切位点，但用Sma I切割目的基因时，会破坏目的基因，因此形成重组质粒A时，应选Pst I和EcoR I切割目的基因和质粒．
（2）质粒被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同时切割后会被分割成三段，Sma I切割质粒后形成的是平末端，EcoR I、Pst l切割质粒形成的是黏性末端，且这两种限制酶切割各形成两个黏性末端，所以三种限制酶切割质粒会形成四个黏性末端．
（3）培养基中的氨苄青霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，所以导入的重组质粒中要含氨苄青霉素抗性基因，才能在含氨苄青霉素的培养基是生长．
（4）要培养无病毒的香蕉植株，一般选用植物的分生组织，如根、茎、芽的尖端，因为植物根、茎、芽尖生长快，无病毒，在这样的植物根、茎、芽尖细胞中导入含目的基因的农杆菌后，可培养既抗病又无病毒的香蕉植株．
（5）结合题目可知培养转基因抗病毒香蕉使用了基因工程技术和植物组织培养技术，其中基因工程技术的原理是基因重组，植物组织培养技术的原理是植物细胞具有全能性．
故答案：（1）Pst I和EcoRI（写全给分）   含抗病基因的DNA和质粒 （光写“目的基因”者不给分）
（2）3    4
（3）抗氨苄青霉素（或氨苄青霉素抗性）
（4）根（茎、芽）尖（或分生组织）
（5）基因重组、植物细胞具有全能性

点评：本题考查基因工程和植物细胞工程的相关知识，意在考查学生对基因工程的相应知识的理解能力及在较复杂情景中综合运用相应知识进行分析、判断、推理和评价的能力．